陕西细胞疗法产品支原体检测快速检测

AdvSHENTEK外源因子全自动核酸检测分析系统凭借优越性能，为支原体检测提供坚实技术支撑。硬件方面，系统温度运行精度≤0.5℃，温度波动控制在 ±0.5℃以内，荧光强度 CV≤3%，确保检测结果的重复性与准确性；4 通道单独运行且支持同步检测，通道可叠加延展，兼顾检测效率与灵活性。软件方面，系统具备三级权限管理、日志审计追踪功能，完全符合 21CFR Part11 法规要求，支持 LIMS 系统连接、USB 数据导出及打印机直接打印，满足企业合规追溯需求。此外，系统运输与储存便捷，仪器可常规运输，检测试剂盒在 2-8℃环境下即可稳定保存，无需特殊冷链条件，进一步提升了产品的实用性与适配性。

目前支原体检测主要有培养法、指示细胞培养法和核酸扩增技术（NAT）法三类，三者在性能与适用场景上差异明显。培养法作为检测金标准，灵敏度极高，但检测周期长达 28 天，手动操作需数天，依赖较高水平的操作技能，且因使用活菌株作为阳性质控，污染风险高，需在特殊实验室开展，检测前还需进行培养基灵敏度验证。指示细胞培养法为药典认可的传统方法，成本较低，但检测周期仍需 14-20 天，灵敏度偏低，同样存在活菌株污染风险，无法满足快速放行需求。NAT 法（核酸扩增法）检测周期只需 3-7 小时，手动操作时间为数小时，采用灭活菌株降低污染风险，样本需求量少、灵敏度高，但无法区分死菌与活菌，且需要开展充分验证，对操作人员的专业技能有一定要求，已逐步成为生物制药企业产品放行检测的youxia方案。

湖州申科的支原体培养法样品检测流程严格遵循 USP 标准，步骤规范且逻辑严谨。接种环节：每 100mL 液体培养基接种 10mL 供试品，每类固体培养基接种 0.2mL 供试品；培养条件：置于 36±1℃、5-10% CO₂的湿润环境中培养 28 天。继代培养需在特定时间点开展：接种后第 2-4 天、第 6-8 天、第 13-15 天、第 19-21 天，每次从每种液体培养基中吸取至少 0.2mL，接种至对应固体培养基继续培养不少于 14 天，其中第 20-21 天的继代培养需持续 7 天。观察频率为每 2-3 天一次，若液体培养物出现颜色变化，需立即进行继代培养，再通过与阴阳性对照培养基的对比，完成结果判定，确保检测无遗漏、无偏差。

湖州申科围绕 USP 支原体培养法，提供技术服务，满足生物制剂企业的合规需求。服务内容包括两项：一是支原体培养法样品检测服务，严格遵循 USP 63 标准流程执行，确保检测结果合规有效；二是支原体培养法样品适用性验证服务，针对供试品特性开展定制化验证，保障检测方法与样品的适配性。所有检测与验证完成后，公司将出具标准化报告，报告可直接用于项目申报、审批、工艺优化等场景，为企业产品质量控制提供依据。通过专业的技术服务，帮助企业规避合规风险，确保生物制剂生产全流程的质量与安全性，助力企业高效推进产品研发与上市进程。

质控结果是支原体 NAT 检测可靠性的前提，需严格遵循判定标准，且需结合实验室实际条件验证适配的标准阈值。质控样品的判定规则明确：NTC（无模板对照）的 FAM 信号需 2 复孔 Ct≥40 或无明显扩增曲线，VIC 信号需 2 复孔 Ct<35 且呈有效 “S” 型扩增；NCS（阴性对照）判定标准与 NTC 一致；PC（阳性质控）的 FAM 信号需 2 复孔 Ct<35 且呈有效 “S” 型扩增，PCS（阳性对照底物）判定标准与 PC 一致。只有质控结果全部满足要求，才能进一步分析样本结果，若质控不达标，需排查设备、试剂、操作等环节的问题并重新检测。

长期以来，支原体检测主要依赖培养法和指示细胞法，且法规通常要求两种方法同时使用，但这两类方法存在明显短板——培养法检测周期长达 28 天，指示细胞法也需较长时间等待结果。随着细胞疗法药物快速发展，其上市周期短、货架期有限的特点，使得传统方法难以满足药物放行的时效要求。核酸扩增技术（NAT）尤其是荧光探针 qPCR 检测方法的出现，凭借检测速度快、特异性强的优势，成为支原体检测的理想替代方案。作为替代方法，NAT 检测需通过严格验证以达到法规要求的灵敏度：检测限达到 10CFU/mL 可替代培养法，达到 100CFU/mL 可替代指示细胞培养法，从而实现快速且可靠的支原体筛查。