宿主细胞蛋白（HCP）残留检测性能验证

美国药典 USP 通则 <1132.1>《质谱法测定生物药中残留宿主细胞蛋白》（Residual Host Cell Protein Measurement in Biopharmaceuticals by Mass Spectrometry），主要内容是介绍 LC-MS 技术在宿主细胞残留蛋白检测中的应用。该通则围绕样品制备、质谱测试条件建立、数据分析、质谱方法验证等维度，详细说明质谱技术应用于 HCPs 检测的优势及需注意的事项。作为先进的分析技术平台，质谱技术在 HCPs 分析中的应用，无论是单独使用，还是与 ELISA 及其他分析方法联合使用，都能帮助生产企业在产品全生命周期中更清晰地理解并建立 HCPs 检测方法，进而保障产品质量稳定。

SHENTEK^®AbunProteoX 是以磁珠为基础构建的亲和配体，适用于多种生物制品样本。其操作流程经精心设计，简化高效，方便用户操作。与传统非变性酶解方法相比，AbunProteoX 能有效提升 HCP 的检出效果，有效降低质谱分析的检测下限，使低丰度蛋白得以有效检出，保障了检测的高灵敏度。即便存在高丰度目标蛋白时，经 AbunProteoX 处理后，仍能有效分析宿主细胞蛋白（HCPs），为生物制品中宿主细胞蛋白残留控制提供了简便、易用且高效的样品处理工具。

在宿主细胞蛋白（HCP）残留检测方面，工艺特异型检测试剂盒（upstream-process）专门针对特定生产工艺设计，其关键特征是依托产物的实际宿主细胞开展开发及验证，通过模拟真实生产流程制备广谱 HCP 抗原，且要求抗血清具备高覆盖率以适配工艺变动，从而保障对特定生产流程中 HCP 残留的高度准确监控。平台型检测试剂盒（platform）则由生产商围绕特定表达宿主细胞及相近工艺自主开发，优势体现在能借助相同参考标准品与试剂，统一监测基于该宿主细胞生产的不同产品，适用于上游工艺足够相似的产品线。通用型检测试剂盒（commercial）属于市售广谱检测方案，适合相似宿主细胞的常规 HCP 检测；但由于其制备过程未必能完全模拟目标产物的实际生产场景，因此需严格评估多克隆抗体对特定产品 HCP 的覆盖率，以此确保检测结果的可靠性。这三类试剂盒覆盖了从深度定制到通用筛查的各类 HCP 检测需求。

毕赤酵母（Pichia pastoris）作为第二代酵母表达系统的代表性菌株，已被美国 FDA 认定为 GRAS（一般认为安全）级微生物，具备表达水平高、产物活性优、培养成本低、易于扩大至工业化生产等优势。在生物制药领域，酶制剂、胰岛素、表皮生长因子、胶原蛋白等多款生物制剂，已借助毕赤酵母系统实现商业化生产。和其他产品杂质类似，毕赤酵母宿主残留蛋白（HCP）可能对生物制品的安全性与有效性造成不利影响，故而在生产监测、产品放行等环节中，需对其开展定量研究并实施严格控制。SHENTEK^® 毕赤酵母 HCP 残留检测试剂盒（一步酶联免疫吸附法），是湖州申科生物自主研发的毕赤酵母 HCP 通用检测试剂盒，不仅拥有完全自主知识产权，还实现了关键试剂的全国产化。该试剂盒适用于对 GS115、X33 等毕赤酵母菌株生产的生物制品中宿主残留蛋白进行定量检测，具有操作步骤少、检测速度快、专一性强、性能稳定可靠的特点。

湖州申科生物推出的宿主细胞残留蛋白检测全自动 ELISA 分析系统，集成了标曲制备、样本加样、恒温孵育、板孔清洗及结果检测等全流程操作功能。系统配备的高精度前处理模块与检测模块，能通过准确控制实验参数，切实降低人为操作误差，保障实验结果的稳定性与准确性。该系统采用多模块单独运行设计，可实现不同检测任务的并行处理，大幅缩短实验周期，提升整体实验效率。在保障结果可靠性的前提下，系统实现了 ELISA 实验的自动化操作、流程标准化与结果快速输出，降低了对实验人员的技能要求，同时通过优化资源配置降低检测成本。此外，系统内置完善的数据管理功能，可满足实验数据完整记录与全流程审计追踪的需求，严格契合 21 CFR Part 11 法规要求，且配备三级权限管理机制，进一步保障实验数据的安全性与规范性。

湖州申科生物专注于研发贴合实际生产工艺的商业化宿主细胞蛋白（HCP）残留检测试剂盒，依托不同工艺下 HCP 的差异化分析，针对性推出各细分工艺领域的 HCP 检测试剂盒。实验数据显示：针对 CHO-S 与 CHO-K1 两种宿主细胞，两类细胞共享 2458 种相同 HCP（占比 79.7%），但各自存在 392 种和 236 种特异性 HCP，充分体现工艺差异带来的残留蛋白特异性。进一步对比 B3 表达菌与 K2 克隆菌，尽管二者共享 1489 种相同蛋白（分别占比 88% 和 85%），但仍各自检出 208 种和 258 种独有蛋白，差异率为 12%-15%。这些结果直接证实，不同工艺路线与克隆株选择会影响 HCP 残留谱的构成。据此，湖州申科提出 “工艺定制化检测” 策略：通过准确识别共性与特异性 HCP，针对性研发细分试剂盒产品。