E.coli表达菌宿主细胞蛋白（HCP）残留检测高风险蛋白

湖州申科生物搭建起专业化宿主细胞蛋白（HCP）残留检测平台，采用 ELISA 技术对宿主细胞蛋白总量展开分析，严格控制 CV 偏差与回收率指标，确保实验结果的真实性，其研发的试剂盒及抗体具备高灵敏度、强特异性等优势。该平台在技术服务层面提供两类关键支撑：一是针对 CHO、大肠杆菌（E.coli）、酵母等多种宿主的 HCP 残留检测服务，可直接输出蛋白残留量与样品回收率数据；二是配套的样品适用性验证体系，借助基质定量下限验证、样品稀释度验证、准确性验证及精密度验证（包含重复性与中间精密度）等多维度检测方案，搭配完整的试剂盒性能报告，保障检测结果的准确性与可溯源性，为生物制品工艺杂质控制提供可靠支持

宿主细胞蛋白（HCP）的来源中，常伴随核酸、胞膜脂类及培养基中的氨基酸等非HCP成分，这些成分会干扰总蛋白检测的准确性，因此在检测前需开展纯化前处理，同时对总蛋白检测方法实施方法学确认。HCP本身属于多蛋白混合物，不同总蛋白定量方法的检测结果会存在一定差异，这也是造成HCP免疫检测方法结果不一致的原因之一。若不同HCP蛋白定量方法的检测结果差异较大，通常需同时采用2种及以上经确认的方法进行检测，随后取平均值。总蛋白检测方法的定量限通常只能达到μg/mL级别，而HCP检测试剂盒的产品校准品浓度则处于ng/mL级别。将HCP高浓度原液稀释至低浓度产品校准品的过程中会产生稀释误差，因此需对产品校准品重新进行标定赋值。编辑分享用多种方法确认检测结果时，如何选择合适的方法组合？总蛋白检测定量限与HCP校准品浓度差异大的原因是什么？有哪些方法可以降低非HCP成分对检测的干扰？

为更优管控工艺、保障产品质量稳定，各国监管机构均要求提供所用宿主细胞蛋白（HCP）残留检测ELISA试剂盒的抗体覆盖率数据。通常需开展覆盖率分析的场景主要有以下四类：①临床II期后，若仍使用商品化试剂盒，需评估其抗体覆盖率是否能持续满足质量监控需求；②临床III期及后续阶段，若产品研究者开发了平台化或工艺专属型HCP监测方法，此类试剂盒使用前需评估其覆盖率水平与商业化试剂盒覆盖率水平的差异；③申报阶段若未提交覆盖率数据，监管机构可能向企业提出补充提交的要求；④产品上市后，若发生生产场地变更、工艺变更、HCP分析方法变更等情况，研究者需评估变更前后抗体覆盖率水平的差异，以及该差异对药品质量与安全性的影响。

为何定制化试剂盒是宿主细胞蛋白（HCP）残留检测的优先选择？特定工艺来源的抗原与校准品更具代表性，是重要原因之一。不同生物制品的上游生产工艺存在差异，比如培养基、培养条件、收获时机等不同，都会使产生的 HCP 在蛋白种类、丰度及翻译修饰上出现区别，进而导致进入下游纯化工艺的 HCP 类型相应改变 —— 尤其是与药物主成分共同纯化的 HCP，会以优势蛋白的形式存在于药物原液或制剂中。HCP 定制化 ELISA 检测试剂盒通常选用实际生产工艺中上游发酵后的样品制备抗原与校准品，这样制得的校准品能较充分地体现实际工艺中的 HCP，有效降低因抗原或校准品种类不足引发的漏检风险，同时减少定量不准确的问题。

MDCK（Madin-DarbyCanineKidney，马丁达比犬肾上皮细胞）细胞系是源于犬肾的持续性细胞系，广泛应用于流感病毒增殖纯化、流感疫苗生产等过程，作为细胞基质使用。凭借高病毒产量与滴度、无适应性突变、易驯化等优势，MDCK细胞已成为业界公认的流感病毒毒株分离及流感疫苗生产适配细胞系。和其他产品杂质类似，MDCK宿主残留蛋白（HCP）可能对生物制品的安全性与有效性产生不良影响，因此在生产监测、产品放行等环节，需对其开展定量研究并实施严格控制。SHENTEK^®MDCK HCP残留检测试剂盒（一步酶联免疫吸附法），是湖州申科生物自主研发、拥有完全自主知识产权且关键试剂实现全国产化的MDCK HCP通用检测试剂盒。该试剂盒适用于基于MDCK细胞基质的病毒增殖纯化、疫苗生产等过程，可对其中的MDCK宿主残留蛋白进行定量检测，且操作步骤简便快捷、检测专一性高、性能稳定可靠。

定制化试剂盒之所以成为宿主细胞蛋白（HCP）残留检测的优先选择，关键原因之一是其构建的检测体系更契合商业化生产中HCP工艺杂质的控制需求。在HCP校准品与HCP抗体这两大关键试剂组分达标后，定制化方法的建立与优化会依托真实的纯化中间品及原液样品开展——通过优化检测条件提升对低浓度HCP的检测灵敏度，从而满足工艺验证与过程控制的需求。临床三期阶段需对生产工艺开展系统验证，以保障其稳定性与可重复性，而定制化HCPELISA检测方法能更准确地监测工艺中HCP的去除效果，为工艺验证提供坚实支撑。过程控制环节，借助工艺特异型HCP ELISA检测方法，可实时监测生产过程中的HCP水平，拥有更强的生产异常预警能力，能及时排查生产风险，保障产品质量稳定。