成都宿主细胞蛋白（HCP）残留检测方法开发

中国仓鼠卵巢细胞（Chinese Hamster Ovary，CHO）是生物制品生产中常用的动物细胞表达系统，广泛应用于抗体、重组蛋白、疫苗等产品的制备。采用 CHO 细胞作为宿主进行生产时，难免会引入宿主细胞蛋白（HCP）杂质；即便 HCP 残留量较低，仍可能存在免疫原性，还会带来降低产品蛋白稳定性等风险。因此，需对生物制品中的 HCP 残留进行定量分析，从而保障纯化工艺的一致性与终产品的安全性。SHENTEK^®CHO 宿主细胞蛋白（HCP ）残留检测试剂盒实现了关键试剂的全国产化，其通过 CHO 细胞（K1&S）补料分批培养工艺制备 HCPs，再以此免疫绵羊获取抗体，适用于检测 CHO 细胞系表达的生物制品（如单抗、重组蛋白、疫苗等）中的 HCP 残留。该试剂盒具有操作步骤少、检测速度快、专一性强、性能稳定可靠的特点。

凭借高分辨质谱技术，湖州申科生物推出宿主细胞蛋白定制化检测服务组合，可满足生物制品残留蛋白的分析需求。该平台服务内容包括：1、HCP蛋白检测定制化服务：借助ELISA、双向电泳（2D）与LC-MS/MS技术，为常规生物制品检测、高危及工艺相关蛋白数据库搭建、特殊生物制品分析提供支持；2、抗体覆盖率服务：运用自主研发的IMBS技术结合质谱，准确评估ELISA试剂盒对工程细胞HCP的捕获能力，同时完成校准品表征；3、靶向HCP检测：专注于高风险残留蛋白的检测方法开发；4、蛋白种属鉴定服务：利用LC-MS技术追溯样品中的物种特异性肽段。该服务体系以多技术联用和深度定制化策略为支撑，可满足从基础筛查到工艺关键杂质监控的全维度需求。

湖州申科生物在宿主细胞蛋白（HCP）ELISA 检测技术领域具备扎实的技术积累，已搭建起高质量、全流程的自主开发平台，覆盖 HCP 检测试剂盒研发的关键环节：①抗原表征与制备：依托合规平台具备 HCP Reference/Antigen 制备能力，借助 2D 凝胶电泳等先进技术保障抗原库的代表性；②动物免疫与抗体制备：凭借自有免疫动物平台，把控免疫原设计及动物免疫过程，产出高特异性、广覆盖度的抗体；③体系开发与验证：依靠成熟技术经验开发高灵敏度、高稳定性的检测体系，并严格遵循 GMP 标准完成方法学验证。该平台通过全流程自主可控的技术整合，从源头保障试剂盒性能的一致性与可靠性，大幅降低不同批次试剂盒的检测变异性。其研发的 HCP ELISA 试剂盒已服务国内外 200 余家生物医药企业，为单抗、疫苗等生物制品的工艺开发、质量控制及 IND/BLA 等法规申报，提供符合监管标准的定制化检测方案。

湖州申科生物凭借自主可控的供应链与经严格验证的技术性能，确保 HCP 检测试剂盒的长期稳定供应及出色分析能力。一方面，公司实现关键物料自研自产：校准品通过冻干工艺大规模生产，能稳定储存 10 年以上；抗体经大动物免疫制备，产量可支撑≥10,000 盒试剂盒生产，确保同批次抗体连续供应超 10 年；试剂盒经多批次验证，批内与批间一致性表现良好。另一方面，所有产品均参照 ICH Q2（R2）及 ICH M10 法规要求完成验证：以大肠杆菌（E.coli）HCP 产品为例，其线性范围（1-243 ng/mL）的 R²>0.999，各浓度点回收率偏差≤5%；准确度处于 81.2%-111.6% 区间，中间精密度 CV 值为 5.7%-12.4%；定量限（LLOQ）低至 1.5 ng/mL，且对 CHO、HEK293 等多种宿主细胞的交叉反应均低于检测限。同时，借助二维电泳（检出 826 个蛋白点）与质谱法（鉴定 2204 个蛋白点）对校准品进行双重表征，并运用 IMBS-2D（覆盖率 > 70%）与 IMBS-MS（覆盖率 84.7%）正交技术验证抗体覆盖率，从源头保障检测结果的全面性与可靠性。

毕赤酵母（Pichia pastoris）作为第二代酵母表达系统的代表性菌株，已被美国 FDA 认定为 GRAS（一般认为安全）级微生物，具备表达水平高、产物活性优、培养成本低、易于扩大至工业化生产等优势。在生物制药领域，酶制剂、胰岛素、表皮生长因子、胶原蛋白等多款生物制剂，已借助毕赤酵母系统实现商业化生产。和其他产品杂质类似，毕赤酵母宿主残留蛋白（HCP）可能对生物制品的安全性与有效性造成不利影响，故而在生产监测、产品放行等环节中，需对其开展定量研究并实施严格控制。SHENTEK^® 毕赤酵母 HCP 残留检测试剂盒（一步酶联免疫吸附法），是湖州申科生物自主研发的毕赤酵母 HCP 通用检测试剂盒，不仅拥有完全自主知识产权，还实现了关键试剂的全国产化。该试剂盒适用于对 GS115、X33 等毕赤酵母菌株生产的生物制品中宿主残留蛋白进行定量检测，具有操作步骤少、检测速度快、专一性强、性能稳定可靠的特点。

湖州申科生物专注于提供契合严苛法规要求的宿主细胞蛋白（HCP）ELISA 检测试剂盒，主要目标是满足抗体药、疫苗等生物制品在 IND/BLA 申报阶段的监管标准。为实现这一目标，公司搭建了全流程依规开发的质量管控体系 —— 整个开发过程严格遵循 ISO 13485 质量标准，同时能充分满足用户审计需求，从体系层面保障产品合规性。其开发流程包含三大关键阶段，前两大基础阶段聚焦关键物料的品质把控：一是 HCP 残留定量检测参考品开发，重点是构建可靠的 HCP 抗原参考品，需完成抗原表征、量值溯源与赋值、均一性验证及稳定性考察等工作，为检测准确性与样品代表性奠定基础；二是高质量大批量抗体制备，通过优化的 HCP 抗原动物免疫策略，搭配严谨的抗体质量标准（含标准制定、覆盖率验证）与稳定的制备工艺，生产出高特异性、广覆盖度的检测抗体，确保后续检测的特异性与灵敏度。