重庆E.coli宿主细胞残留DNA检测常见问题

湖州申科生物 rHCDpurify^® 前处理系统，是宿主细胞残留 DNA 检测样本前处理的实用工具，拥有多项优势。在操作便捷性上，其支持自动扫码功能，输入过程准确且简便高效，同时配备超大屏幕，便于操作人员使用；温控表现突出，具备准确控温能力，有助于提升裂解与洗脱效率，降低因温控不当引发的系统误差，为后续检测打下良好基础。从提取性能来看，该系统符合系统性能验证及挑战性实验标准，能可靠完成样本前处理工作，保障检测的准确性与可靠性；试剂配套方面，它与 SHENTEK^® 各类前处理试剂盒适配，可有效规避手动操作带来的误差，保障实验结果的稳定性。此外，该系统拥有多种程序模式，可实现磁珠法试剂盒与样本前处理的自动化提取操作，不仅提升了工作效率，还减少了人工干预可能引发的误差，为宿主细胞残留 DNA 检测样本前处理提供了稳定、高效、准确的解决方案。

SHENTEK^®CV-1残留DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法），可对各类生物制品的中间品、半成品及成品中CV-1宿主细胞DNA进行定量检测。该试剂盒基于荧光探针法原理，实现对样品中CV-1残留DNA的定量分析，具备检测快速、专一性强、性能稳定可靠的特点，检测限可达到fg级别。试剂盒内配套有CV-1 DNA定量参考品，且与SHENTEK^®宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒搭配使用，可准确定量样品中的CV-1残留DNA。整个分析系统通过优化前处理与检测步骤的兼容性，能有效提升对CV-1细胞微量DNA残留的回收率及定量准确度。

湖州申科生物的产品研发与制造过程遵循 ISO13485 质量管理体系要求开展，并参照 CDE《生物制品质量控制分析方法验证技术审评一般原则》、《中国药典》9101 分析方法验证指导原则及 ICH Q2 (R2)《分析方法验证指导原则》等法规文件，对 SHENTEK 系列宿主细胞残留检测试剂盒实施了全面性能验证，涵盖线性、范围、准确性、定量限、精密度、耐用性、专属性等项目，结果符合法规标准。公司可向用户提供试剂盒的详细验证报告，用户若采用此验证报告，只需开展针对样品的适用性验证（含精密度实验与回收率实验）即可。

宿主细胞残留DNA检测中若回收率不达标，可依照以下思路排查。首先查看PCS/NCS，确认PCS回收率是否合格、计算公式是否无误，同时检查NCS质控是否达标。随后排查试剂与耗材，核实洗涤液B是否过期或配制有误，异丙醇是否符合分析纯标准，常温试剂是否出现结晶，试剂储存温度是否恰当，以及磁珠是否难以重悬。再聚焦样品情况，确认样品残留量与加标量是否适宜，pH值是否存在异常，以及是否含有抑制因子干扰磁珠功能与PCR实验。完成上述排查后，再审视操作流程，检查样品是否彻底消化、消化后状态是否呈可流动状，磁珠是否复温，洗涤与洗脱过程中磁珠状态如何、是否被误弃，以及洗脱前磁珠是否过度干燥等。

疫苗、抗体、重组蛋白、多肽及小分子药物等产品，多借助连续传代细胞系进行表达生产。即便经过多步纯化工艺处理，终产品中仍可能残留源自宿主细胞的 DNA（即 Host cell DNA，简称 HCD）。HCD 中可能含有功能基因，若其中存在显性致病基因或病毒基因组，未经验证、未充分去除或灭活的 HCD 残留在制品内，可能通过基因层面的随机插入突变，或是诱发过度 / 异常的免疫原性反应，给用药者造成不可预测的重大健康风险。由此可见，对宿主细胞残留 DNA 开展定量检测，对于监测药物产品的安全性与质量可控性而言，具有重要意义。

SHENTEK^® MRC-5 残留 DNA 检测试剂盒，可对各类生物制品中间品、半成品及成品中的 MRC-5 宿主细胞 DNA 进行定量检测。该试剂盒基于荧光探针原理，实现对样品中 MRC-5 残留 DNA 的定量分析，具备检测速度快、专一性突出、性能稳定可靠的优势，检测限可达到 fg 级别，且试剂盒内配备 MRC-5 DNA 定量参考品。该试剂盒与 SHENTEK^® 宿主细胞残留 DNA 样本前处理试剂盒搭配使用，准确完成样品中 MRC-5 残留 DNA 的定量检测。整个分析系统通过优化前处理与检测步骤的适配性，提升 MRC-5 细胞微量 DNA 残留的回收率及定量准确度。