安徽CHO宿主细胞残留DNA检测方案

宿主细胞残留DNA非常主要的转化潜能源于其可能携带活性的显性转化基因（例如 myc、经过特定修饰的 ras）。这类基因拥有显性遗传特性，其表达产物能够直接赋予正常细胞获得性功能，驱动细胞发生转化并形成不适当的生长特性，导致部分细胞获得异常生长特性（这一点已被众多严谨的动物模型实验所证实）。与这种直接的强力作用相比，残留DNA片段通过插入宿主基因组位点诱发特定的关键基因（如影响细胞周期的关键控制点或关键生长调控基因）失活或过度处于活性状态的机制，发生的频率被认为相对较低。具体而言，在某个特定的关键位置发生整合，从而抑制一个关键的生长负调控基因或异常活化一个促进生长的关键基因，其产生的概率和总体频率也受到相当大的限制。

SHENTEK^®质粒 DNA 残留检测试剂盒用于定量检测基因治疗产品中质粒 DNA 残留的检测试剂盒，如 CAR-T 细胞中慢病毒载体制备相关的质粒 DNA。本试剂盒利用 Taqman 探针原理，通过各质粒共有 DNA 序列， 如ColE1/pMB1/pBR322/pUC 来源的复制子，定量检测样品中质粒 DNA 的残留。客户可以事先将质粒 DNA 序列给湖州申科生物技术人员进行确认。本试剂盒检测快速，专一性强，性能可靠，检测限可以达到 10² copies/μL。试剂盒配套有质粒DNA 定量参考品。本试剂盒与 SHENTEK^®宿主细胞残留 DNA 样本前处理试剂盒配套使用，可准确定量样品中残留的微量质粒 DNA。

SHENTEK^® HEK293 残留 DNA 检测试剂盒用于定量检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中 HEK293 宿主细胞 DNA 的试剂盒。试剂盒利用荧光探针原理，定量检测样品中 HEK293 残留 DNA。检测快速，专一性强，性能稳定可靠，检测限可以达到 fg 水平。试剂盒配套有 HEK293 DNA 定量参考品。本试剂盒与 SHENTEK^®宿主细胞残留 DNA 样本前处理试剂盒配套使用，整个分析系统通过优化前处理与检测步骤的兼容性，明显提升对HEK293细胞微量 DNA 残留的回收率与定量准确度。

重组蛋白、抗体、疫苗、细胞与基因产品等生物制品大多来自生物工程细胞 ( 细菌、酵母、动物或人源细胞 ) 的复杂表达 / 生产系统，不同宿主的 rHCD 和 rHCR 不同，且存在不同片段长度和组成的复杂阵列，其风险须根据具体情况评估。各国药品监督管理机构对终产品中宿主细胞残留 DNA 的含量有着严格的限度控制，大多为不超过 10ng/ 剂或更低。湖州申科生物自主开发一系列宿主细胞残留 DNA荧光探针 qPCR 定量检测试剂盒，以及特定细胞系定制化试剂盒的开发、生产和测试，可满足不同宿主检测需求。

宿主细胞残留 DNA 检测稳定性由三方面决定。样本核酸处理可选用磁珠法或碘化钠法，提取方式有手工或自动化，关键是要有效去除杂质抑制物，且适配复杂样本，保障后续检测基础；qPCR 检测试剂盒涉及标准品，以及含 Mastermix、引物、探针、缓冲液、稀释液的反应体系，其质量与配置影响检测准确度；检测系统主要是 qPCR 仪器，仪器性能与稳定性关乎检测数据可靠性。三者协同，从样本处理、试剂质量到检测设备，共同构建宿主细胞残留 DNA 检测稳定体系 。

湖州申科生物rHCDpurify^® 前处理系统是用于宿主细胞残留 DNA 检测样本前处理的得力工具，具备诸多优势。在操作便捷性上，它支持自动扫码，输入准确且简单高效，同时配备超大视屏，方便操作人员使用。温控方面表现出色，能精确控温，这有助于提高裂解和洗脱效率，减少因温度控制不当带来的系统误差，为后续检测奠定良好基础。从提取性能来看，该系统符合系统性能验证和挑战性实验要求，能够可靠地完成样本前处理工作，保障检测的准确性与可靠性。在试剂配套上，它搭配 SHENTEK^® 各类前处理试剂盒，可有效避免手动操作产生的误差，确保实验结果的稳定性。此外，该系统具备多种程序模式，能实现磁珠法试剂盒和样本前处理的自动化提取操作，不仅提高了工作效率，还减少了人工干预可能带来的误差，为宿主细胞残留 DNA 检测样本前处理提供了稳定、高效、准确的解决方案。