外泌体的提取主要包括以下几种方式。一是超速离心法，这是目前外泌体提取较常用的方法。此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块，由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种方法得到的是微泡不是外泌体。二是过滤离心，这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样存在纯度不足的问题。三是密度梯度离心...

  糖原染色（PAS）：（1）原理：过碘酸将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合，形成紫色化合物，定位于细胞质中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分钟，流水冲洗，晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟，流水冲洗，晾干。滴加雪夫液作用60分钟，流水冲洗，晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟，流水冲洗，晾干镜检。（4）...

  可以通过pas染色计算糖原含量吗：PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用来显示糖元和其它多糖物质.具体现象例举：阳性反应,胞浆呈红色,阴性反应,胞浆呈无色；在正常血片中RBC不染色；PLT染成深红色；中性粒细胞胞浆染成红色或深红色,有些细胞有阳性颗粒；单核细胞的胞浆染成淡红色,可含有细小或粗大阳性颗粒；少数淋巴细胞的胞浆内含有少许...

  细胞转染实验注意事项：1.如为贴壁生长细胞，一般要求在转染前一日，必须应用胰酶处理成单细胞悬液，重新接种于培养皿或瓶，转染当日的细胞密度以70-90%（贴壁细胞）或2×106-4×106细胞/ml（悬浮细胞）为宜，较好在转染前4h换一次新鲜培养液。2.用于转染的质粒DNA必须无蛋白质，无RNA和其他化学物质的污染，OD260/280比值应...

  细胞冻存和复苏的原则：慢冻速融，这样更加有利于保持细胞的活力。冻存细胞不加任何保护剂，会导致细胞内冰晶的产生，从而使细胞产生内源性的机械损伤，引起细胞内环境渗透压，PH，电解质等的改变，进而促使细胞死亡。细胞冻存液除去蛋白酶，添加适量配置好的冻存细胞培养液.细胞培养的传代及日常维持过程中，在培养器具、培养液及各种准备工作方面都需大量的耗费...

  PAS染色的临床意义①帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞或Reed-Sternberg细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性或阴性反应。②帮助鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性反应，且空泡中心为阴性反应。③帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，后者呈强阳性反应，阳性反应物质为红色细颗粒状或粗颗粒状，有时呈红色块状...

  鼠尾胶原：含细胞三维胶原凝胶的制备（以配制1mg/mL三维胶1mL为例）准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液，混匀后立...

  染色流程相对简便、染液易配制的染色方法；选择染色流程简便的方法，无论对于量较多的整批次染色，还是较少量的染色均能够节省时间、更为便捷。选择染液易配制的方法，对自配染液（尤其是保存较短的染液）是较为重要的选择，不容易造成因染液配制问题而影响染色结果。如显示弹性纤维。醛品红染色法无论是从染色流程，还是染液配制都要比铁苏木精、间苯二酚碱性品红等...

  鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明：不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即...

  细胞转染为什么不能加血清：不同的细胞及转染试剂要求转染的条件是不同的。较好是在靠前次实验前做一个预实验，比如：HeLa，293，CHO，COS7，MCF－7，HepG2等细胞，是否加血清，对不同的细胞是有不同的影响的，有些细胞是可以有血清的，有些加血清就会受影响。转染后在6小时左右较好换液且换为有血清的培养基，其一因为普通转染试剂对细胞的...

  无血清细胞冻存液的用途：用途：1.无血清细胞冻存液用于造血干细胞、间充质干细胞等干细胞的储存。2.无血清细胞冻存液用于T淋巴细胞、NK细胞等免疫细胞的存储。3.无血清细胞冻存液用于其他类型哺乳动物细胞的储存。无血清细胞冻存液产品性能：1.不含牛血清，无动物源组分。传统的冻存液，一般由胎牛血清、DMSO等组分组成。胎牛血清取自牛，因此，难以...

  如何提高细胞转染实验效率：优化细胞生长状态密切观察您的细胞;确保它们状态良好。在开始转染细胞之前，先制定一个适当的种板方案，使细胞密度从转染开始到结束都保持较佳状态。增加成功几率—细胞是转染过程中的一个关键元素，它可以是影响结果的一致性和质量的较重要的变量。此外，还常用促有丝分裂刺激物(如，细菌转化，生长因子，条件培养基，以及滋养细胞)来...