永生化的细胞系往往相当健壮，因此，使用实验室自制的冻存培养基，效果也不错。典型的配方是在生长培养基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清，或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代细胞中的一些水，以防止冰晶形成，刺穿细胞。据赛默飞世尔科技的较深科学家RhondaNewman介绍，DMSO还能防止细胞在冷冻期间发生收...

  冻存细胞注意事项：冻存细胞系以备将来之用时，必须遵守以下原则。我们建议您严格遵守您所用细胞系附带的操作说明，以便获得较佳结果。在细胞处于生长期密度达到70-90%的情况下进行培养细胞的冻存，并且细胞传代尽可能靠前。确保冻存前活细胞百分比至少为90%。请注意较佳冻存条件取决于所用细胞系。细胞应缓慢冷冻，可使用可控制降温速度的低温冰箱或者低温...

  外泌体的提取分离：1、PEG-base沉淀法。聚乙二醇（PEG）可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀，早先应用于从血清等样本中收集病毒，现在也被用来沉淀外泌体，其原理可能与竞争性结合游离水分子有关。利用PEG沉淀外泌体存在不少问题：比如纯度和回收率低，杂蛋白较多（假阳性），颗粒大小不均一，产生难以去除的聚合物，机械力或者吐温-20等化学添加...

  根据胶原的结构和功能可将其分为：1.锚丝状胶原（collagenofaachoringfilament）Ⅶ型胶原属此组，其肽链三螺旋长达1530个氨基酸，中间穿插许多非胶原序列。两条前胶原肽链的羧基端肽端-端重叠交联形成二聚体，多个二聚体以羧基端交联区为中心侧-侧聚集成锚丝状纤维。这一纤维的两个氨基端肽连接到基地膜的某种分子上起锚定作用，...

  细胞外基质：胶原蛋白：胶原蛋白属于不溶性纤维形蛋白质，是细胞外基质的主要成分，遍布于各部位和组织。胶原蛋白一般占哺乳动物体内蛋白总量的25%（质量分数）。结缔组织中的胶原主要是Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原，Ⅳ型胶原主要存在于基底膜。胶原蛋白为动物结缔组织提供抗外张力的能力。其基本结构为三股胶原蛋白多肽链相互缠绕形成的三螺旋结构，直径为1.5nm。部分...

  构成细胞外基质的大分子：胶原collagen胶原是动物体内含量较丰富的蛋白质，约占人体蛋白质总量的30%以上。它遍布于体内各种部位和组织，是细胞外基质中的框架结构，可由成纤维细胞、软骨细胞、成骨细胞及某些上皮细胞合成并分泌到细胞外。目前已发现的胶原至少有19种，由不同的结构基因编码，具有不同的化学结构及免疫学特性。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ及Ⅺ型胶原...

  细胞外基质生理学功能：趋硬性：硬度和弹性也引导细胞迁移，这一过程被称为趋硬性（durotaxis）。该术语是由LoCM及其同事创造的，当时他们发现单细胞倾向于向刚性梯度上迁移(朝向更硬的基底))[此后趋硬性一直被普遍研究。趋硬性背后的分子机制被认为主要存在于黏着斑中，黏着斑是一种大型蛋白质复合物，充当细胞和细胞外基质之间的主要接触位点。这...

  RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。无论是人、动物、植物还是细菌组织，该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样...

  无血清快速细胞冻存液保存条件：储存于4℃以下。质量保障期从产品的生产日期起，为期2年。3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能-20℃冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低，推荐将产品分装成小管后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。无血清快速细胞冻存液细胞冷冻保存方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞...

  超快速多糖多酚植物RNA提取试剂盒：无DNA污染，可直接反转录，荧光定量，不会出现洗脱液含络合Mg离子成分，压制后续PCR反应的情况。本试剂盒提取的RNA可直接用于对前期RNA提取质量非常高的后续实验，如转录组RNA测序，制作基因芯片，荧光定量PCR，核酸杂交，反转录等所有后续实验。一个样十多分钟搞定！具有多糖多酚植物RNA提取试剂盒已普...

  RNA提取：预备工作RNA酶（Rnase）是导致RNA降解较主要的物质。此酶非常稳定，在一些极端的条件下只可暂时失活，但限制因素去除后又迅速恢复活性。常规高温高压灭菌方法和蛋白压制剂不能使所有的Rnase完全失活。1.它普遍存在于人的皮肤上，因此制备RNA时必须戴手套。2.RNase的又一污染源是取液器。根据取液器制造商的要求对取液器进行...

  Trizol法是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，压制细胞释放出的核酸酶。虽然Trizol里面含有RNA酶压制剂的，1ml的Trizol一般较多只能裂解100mg的组织。但是如果组织过量，Trizol无法完全浸润组织无法完全裂解组织，多余组织内的RNA酶等物质会导致RNA的降解。这是RNA降解的很重要的原因。...