细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。细胞冻存的原理：细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以较大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，...

  糖原及粘液染色法注意事项：1、糖原的固定要及时，而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂，有它的弊病，因无水酒精渗透较慢，而且容易产生极化，（极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端）。故用Gendre氏固定液效果较佳，其配法如下：苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各种试剂必须化学纯，亚硫酸钠须有浓厚气味，器皿必...

  细胞外基质：动物细胞外基质包括间质基质和基底膜。间质基质存在于各种动物细胞之间(即细胞间隙中)。多糖和纤维蛋白的胶状物填充了细胞间隙，并作为压缩缓冲液，抵御施加在细胞外基质上的压力。基底膜是细胞外基质的片状沉积物，其上有各种上皮细胞。动物的每种结缔组织都有一种细胞外基质:胶原纤维和骨矿物质构成骨组织的细胞外基质；网状纤维和基质构成疏松结缔...

  鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明：含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加...

  糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2）0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。（3）蒸馏水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分钟。（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用）（5）流水冲洗10分钟。（6）苏木素浸染细胞核2-3分钟。（7）脱水、透明、封盖。结果...

  胶原蛋白的功效与作用：1、胶原蛋白中含有大量甘氨酸，在人体内不仅参与合成胶原，而且还是大脑细胞中是一种克制性递质，以产生对的安静作用，对焦虑症、神经衰弱等有良好的治好作用胶原蛋白食品，在胃里可以克制蛋白质因胃酸作用引起的凝聚作用，从而有利于食物的消化，还有克制胃酸和胃原酶分泌的作用，可减轻胃溃疡患者疼痛，促进胃溃疡愈合。2、胶原蛋白是身体...

  细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以比较大限度的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓...

  什么是细胞外基质（ECM）：多细胞生物，不光由细胞组成，还包括分布于细胞外空间的细胞外基质（ECM）。细胞外基质（ECM）由三维网构成，除了蛋白聚糖和葡糖胺聚糖，胶原蛋白，弹力蛋白和基础纤维之外，在这个空间里还有血管，淋巴管和神经末梢，防御细胞和基底膜。ECM位于上皮或者内皮细胞下层、结缔组织细胞周围，为组织、部位甚至整个机体的完整性提供...

  转染方式：细胞由带负电荷的磷脂双分子层构成，这对大分子物质来说是个不可透过的屏障，比如DNA和RNA的磷酸骨架，其也带负电荷。为了使核酸穿过细胞膜，研究人员开发了多种技术，大致分为三类：化学方法---利用载体分子包被核酸使其呈现中性电荷或正电荷。生物方法---利用基因工程细菌转染非细菌基因到细胞中。物理方法---在细胞膜表面产生一个瞬时的...

  细胞转染的注意事项：细胞状态这点非常重要，不要急于求成，一定要让细胞处于较佳的生长状态再做。有文献说传代不要超过17代。细胞复苏后的3代左右时细胞状态较好，不要用传了很多代的细胞去做，细胞的形态都会发生变化。大多数已建立的细胞系都是非整倍体，原代培养包括了表达不同基因组合的细胞的混合物。细胞培养在实验室中保存数月和数年后会经历突变，总染色...

  细胞转染常用步骤：1.转染试剂的准备①将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。②震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。2.选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂...

  细胞转染简介：转染，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因属于通过物理方法将基因导入细胞的范例；化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术；生物...