胞冷冻保存方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。3.取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rp...

  拭子RNA提取试剂的选择？拭子样本的量与提取的核酸量成正比，如果要提高核酸得率，也可通过增加样本量来实现。一般先取一根拭子的涮洗液样本，然后进行提取，如结果不理想可考虑增加样本量或重新采样。但如果增加样本量或重新采样还不能得到满意结果，应及时考虑更换试剂盒。目前国内常用的拭子核酸提取试剂有Q、Biog等。根据我们的经验，Q和T品牌试剂盒的...

  网状纤维的变化，反映了疾病的发生和发展的不同过程，对疾病的诊断有极大意义。网状纤维的多少、粗细紧密、疏松或断裂，都是病理检验的重要指标，尤其是在临床病理诊断中，可根据其存在和分布来鉴别与肉瘤。而在HE染色标本上，网状纤维不易显色。所以网状纤维的组织化学染色，在临床病理诊断上占着相当重要的位置。网状纤维染色：网状纤维是非常细而短的纤维，大量...

  外泌体研究思路。外泌体研究通常与高通量测序的联系紧密，研究思路可以分为三大类：表达谱、分子标志物和分子机制方向，其中表达谱思路的特点就是短平快、通常以测序数据为主要内容，短平快发表3-5分文章。而分子标志物的特点是在表达谱基础之上加入大量样本验证，建立ROC、KM曲线，分析分子与临床疾病的相关性为主，通常文章影响因子在3-10分之间。分子...

  弹力染色应用：（1）动静脉的辨认：在血管病变时是动脉还是静脉以及是否为血管壁难辨认时，弹力纤维染色有助于辨认。有弹力板者为动脉，有弹力纤维构成血管轮廓者为血管。弹力纤维抗损伤能力较强，故弹力性纤维构成血管轮廓不易损坏。（2）弹力纤维瘤的诊断：弹力纤维染色可见瘤样病变内有大量弹力纤维增生，非真性。（3）心血管先天性弹力组织增生，这组疾病有先...

  特染的应用价值：现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益普遍，但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵，对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势，在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。比如，当细胞...

  糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：PAS染色时需于暗处加盖反应，染色时间10～20min（染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度，SO浓度高，染色时间适当缩短；环境温度高，染色时间也应适当缩短，反之则需适当延长反应时间）。染色过程中不能接触伊红，以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时，较好作消化对照，即取两张连续切片，其中一张脱蜡至...

  糖原D-PAS染色液：使用方法：1、两张相同切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇入水。2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理，入水中1h作为对照。3、流水冲洗两张切片各5～10min。4、入过碘酸溶液，室温放置5～8min，一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent，置...

  糖原及粘液染色法注意事项：1、糖原的固定要及时，而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂，有它的弊病，因无水酒精渗透较慢，而且容易产生极化，（极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端）。故用Gendre氏固定液效果较佳，其配法如下：苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各种试剂必须化学纯，亚硫酸钠须有浓厚气味，器皿必...

  注意事项：染色时：①染色时必须严格按照染色操作说明书进行染色。②在染色过程中，前一个染液浸染完成后，在进行下一个染液的步骤之前，必须彻底充分水洗，使前一个染液冲洗干净后再进行下一步骤。③每次滴加染液前，务必吸干组织上多余的水分，避免多余的水把染液稀释了，造成染色不佳。④在滴加染液时，务必使染液完全覆盖组织，但不能溢出圈外，避免浪费试剂。在...

  PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解，形成水溶性的双糖-麦芽糖，在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手...

  糖原染色(过碘酸-雪夫反应)原理多糖中乙二醇基经过碘酸氧化成二醛基与无色品红结合，形成紫红色化合物。沉积于含糖原的胞浆中。结果：胞浆中出现弥散状，颗粒状，块状红色为阳性。无红色颗粒为阴性_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x000c_临床意义1、正常血细胞的染色反应粒系：原粒细胞糖原含量很...