SP6 RNA聚合酶

T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点：1.**基因编辑效率评估**：-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA，如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接（NHEJ）修复事件引入了突变，变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**：-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变，则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割，通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带，从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA，不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**：-收集细胞并提取基因组DNA，然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性，以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物，在37℃孵育15分钟。与一些其他 DNA 聚合酶不同，T4 DNA 聚合酶不具有 5’→3’外切酶活性，不会对 DNA 链的 5’端进行切割和修饰。SP6 RNA聚合酶

SIGIRR（SingleIgIL-1RRelatedmolecule，又称TIR8）是IL-1R超家族中只有的抑制型受体，通过阻断MyD88、TRIF招募，抑制TLR/IL-1β过度信号，在脓毒症、肠炎及自身免疫疾病中发挥关键刹车作用。本品采用CHO-K1真核表达，完整胞外Ig结构域（aa1-118）融合人IgG1Fc形成稳定二聚体，经ProteinA、离子交换两步纯化，SDS-PAGE非还原条带≈75kDa，纯度≥98%；内素<0.05EU/μg，可直接用于小鼠体内干预实验。功能验证：SPR测定其与TLR4共受体MD-2亲和力KD=8.3nM；在THP-1巨噬细胞模型中，100ng/mL重组SIGIRR-hFc可阻断LPS诱导的NF-κB报告基因活性下降70%，并减少IL-6分泌至基线水平。hFc标签兼容ELISA、流式及免疫共沉淀，可用于定量检测炎症患者血清sSIGIRR水平，亦可固定于芯片高通量筛选激动型或拮抗型抗体。该蛋白为解析先天免疫稳态机制、开发SIGIRR靶向抗疗法提供了高活性、标准化的研究级试剂。SP6 RNA聚合酶它会在识别到该序列后，在“^”标记的位置将 DNA 链切断，产生黏性末端。

SEMA4B属IV类跨膜信号素，兼具轴突排斥与T细胞共抑制双重功能，在阿尔茨海默病、肺病及结直肠病中表达失衡。本品利用HEK293真核表达系统，完整覆盖胞外Sema域及PSI-IPT连接区（aa1-712），C端6×His标签经Ni-NTA与SEC两步纯化，SDS-PAGE呈单一条带，纯度≥97%；内素<0.03EU/μg，适配小鼠体内实验。钙离子依赖性ELISA显示，其与Plexin-B2亲和力KD=9.2nM，可阻断Plexin-B2介导的神经元生长锥塌陷（IC₅₀=60ng/mL）。在CT26荷瘤模型中，腹腔注射20μg重组SEMA4B，病浸润CD8⁺T细胞比例提升2.6倍，同时PD-1表达下调30%，提示免疫刹车解除。His标签支持BLI、SPR及免疫共沉淀，可高通量筛选阻断抗体或降解剂。该蛋白为解析SEMA4B在神经—免疫交叉对话中的分子机制，及开发靶向肿瘤免疫微环境的新型生物制剂，提供了高活性、标准化的研究级试剂。

在分子生物学实验中，PCR技术是基因扩增的重要工具，而Hot-StartTaqMasterMix(2×)(WithDye)则是提升PCR特异性和便捷性的理想选择。这种预混液结合了热启动技术和荧光染料，为效率、准确的基因扩增提供了强大的支持。Hot-StartTaqMasterMix(2×)(WithDye)是一种即用型的2倍浓度预混液，包含Hot-StartTaqDNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs、增强剂以及荧光染料。其优点在于热启动技术的应用。通过在常温下抑制Taq酶活性，该预混液有效避免了非特异性扩增和引物二聚体的形成，从而提高了PCR反应的特异性和灵敏度。这种特性尤其适用于复杂模板（如高GC含量或低丰度基因）的扩增，以及对特异性要求较高的实验场景。荧光染料的加入是该预混液的另一大亮点。这种染料在PCR过程中能够实时监测DNA的扩增情况，通过荧光信号的强度变化反映目标基因的扩增程度。这种“即用型”预混液不仅节省了实验时间，还减少了人为操作带来的污染风险，尤其适合高通量的基因检测和定量分析。此外，该预混液的2倍浓度设计进一步简化了实验操作。实验人员只需加入模板DNA和引物，即可直接进行反应，减少了手动配制反应体系的步骤和可能出现的误差。在构建基因表达载体时，AatII酶更是不可或缺的助手。

T5核酸外切酶在基因克隆中的优势主要体现在以下几个方面：1.**高效性**：T5核酸外切酶依赖性组装（TEDA）方法在常规克隆中的效率与使用专有DNA聚合酶的商业In-Fusion方法相似，但高于使用T5核酸外切酶、PhusionDNA聚合酶和DNA连接酶的Gibson方法。2.**低成本**：TEDA方法每个反应使用0.04U的T5核酸外切酶，价格为0.25美分，具有很高的成本效益。3.**简单性**：TEDA方法的反应混合物非常简单，易于操作，这使得它在预算有限的实验室中尤其有用。4.**灵活性**：TEDA方法能够组装多个DNA片段，并在多个位点同时进行定点诱变，提供了一种灵活的克隆和突变方法。5.**阳性克隆率**：使用T5核酸外切酶的无缝克隆技术可以确保100%的阳性克隆率，这提高了实验的成功率。6.**协同作用**：在无缝克隆中，T5核酸外切酶与Phusion高保真DNA聚合酶和TaqDNA连接酶协同作用，通过切割、填补和连接三个步骤，高效地完成DNA片段的连接。7.**减少污染**：T5核酸外切酶可以降解碱裂解提取质粒中的变性DNA，减少超螺旋DNA的污染，提高DNA克隆和转染效率。这些优势使得T5核酸外切酶成为基因克隆中一个非常有价值的工具，尤其是在需要高效、低成本和操作简便的实验环境中。Cas9 NLS可用于体外实验中筛选能够高效引导Cas9蛋白进行DNA剪切的gRNA序列 。Recombinant Human BMP-7 Protein

Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)经过严格的稳定性测试，即使在反复冻融后仍能保持稳定的活性。SP6 RNA聚合酶

重组人Siglec-2（CD22）采用HEK293真核体系表达，胞外区（Asp20-Arg687）融合hFc标签，分子量约110 kDa，纯度≥98%（SEC-HPLC），内素<0.05 EU/μg，完美保留α2,6唾液酸配体识别位点。CD22是B细胞表面抑制性受体，通过招募SHP-1负调BCR信号，在B-ALL、淋巴瘤及自身免疫病中扮演关键角色。本品以冻干粉形式提供，复溶后即可用于流式检测人源CD22抗体表位；经BirA定点生物素化的Avi版本，可一步固定于链霉亲和素芯片，实现SPR精确测定抗体或ADC药物亲和力。体外实验中，融合蛋白能有效抑制原代B细胞活化，为CAR-T、双特异抗体及ADC的体外功能验证提供可重复的标准工具。配套ELISA试剂盒可定量血清可溶性CD22，辅助疾病监测。4℃短期保存，-80℃长期稳定，每批次附配体结合验证报告，是B细胞研究与靶向治开发不可或缺的高质量试剂。SP6 RNA聚合酶