Recombinant Rat bFGF/FGF-2 Protein

Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)注意事项1.本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。2.不建议37℃条件下酶切，可能会有非特异性酶切出现。3.在＞200mM咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，为获得理想的酶切结果，请先将样品透析到25mMTris-HCl8.0缓冲液中，然后再进行酶切实验；若不方便透析，可将样品稀释到咪唑含量在100mM以下，NaCl浓度在50mM以下，甘油浓度小于5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白比例不变；若干扰因素很多，且不便去除，需要适当增加酶量或延长酶切时间，有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用，痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性，因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。5.本品是具有高酶活力重组肠激酶，切割蛋白使用量少，可不考虑除去。后续如需去除重组肠激酶，可用阴离子交换树脂（如DEAE-FF）对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下：平衡缓冲液：25mMTris-HClpH8.0洗脱缓冲液：25mMTris-HClpH8.0，含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好，可适当增加酶量，或适当延长酶切时间。内分泌腺衍生的血管内皮生长因子（EG-VEGF），也称为（PK1），是分泌蛋白的原蛋白蛋白家族的成员。Recombinant Rat bFGF/FGF-2 Protein

3C样蛋白酶(3CLpro)或主要蛋白酶(Mpro)，正式名称为C30内肽酶或3-胰凝乳蛋白酶样蛋白酶，[2]是在冠状病毒中发现的主要蛋白酶。它在11个保守位点切割冠状病毒多蛋白。它是一种半胱氨酸蛋白酶，是蛋白酶PA家族的成员。它在其活性位点具有半胱氨酸-组氨酸催化二联体并裂解Gln–(Ser/Ala/Gly)肽键。酶委员会将这个家族称为SARS冠状病毒主要蛋白酶(Mpro;EC3.4.22.69)。3CL蛋白酶对应于冠状病毒非结构蛋白5(nsp5)。通用名中的“3C”指的是3C蛋白酶（3Cpro），是一种在小核糖核酸病毒中发现的同源蛋白酶。3C样蛋白酶能够催化裂解P1位谷氨酰胺和P1'位小氨基酸（丝氨酸、丙氨酸或甘氨酸）之间的肽键。例如，SARS冠状病毒3CLpro可以自我切割以下肽：[3][4][5]TSAVLQ-SGFRK-NH2和SGVTFQ-GKFKK是对应于SARS3C样蛋白酶的两个自切割位点的两个肽该蛋白酶在冠状病毒复制酶多蛋白(P0C6U8)的加工过程中很重要。它是冠状病毒中的主要蛋白酶，对应于非结构蛋白5(nsp5)。[6]它在11个保守位点切割冠状病毒多蛋白。3CL蛋白酶在其活性位点具有半胱氨酸-组氨酸催化二元组。[4]半胱氨酸的硫作为亲核试剂，组氨酸的咪唑环作为一般碱基。Recombinant Human Endostatin透明质酸及其衍生物由于其生物相容性和生物降解性，被用作药物的控释载体。

N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义（UnitDefinition）1个酶活力单位指在10μL的反应体系中，37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-15~-25℃保存，有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1）在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白（1-20μg），至终体积10μL；2）100℃温度下煮沸10min使其变性，冰上冷却，离心10秒；3）加入2μL的Buffer2、2μL的10％NP-40、6μL去离子水，总反应体积20μL；4）加入0.2~0.5μL的PNGase，轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。非变性条件下蛋白质去糖基化1）在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白（1-20μg）至体积为20μL。2）加入0.5~1μL的PNGaseF,轻轻混匀。3）37°C孵育4-24h。注意：在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化，在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。

大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质，由于只需要简单的培养基和条件，因此费用低且方便。此外，除了无细胞表达，它是速度的系统，大肠杆菌倍增时间（约20min）比酵母（2h）、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说，在大肠杆菌中表达重组蛋白包括：1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌；2.培养细胞至对数生长期；3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后，相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的，以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类：E．coliRNA聚合酶转录的载体重组肠激酶（rEK）是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段，氨基酸序列与牛肠激酶轻链一致，有着酶切位点。

重组肠激酶（rEK）是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段，氨基酸序列与牛肠激酶轻链一致，有着和天然提取的肠激酶同样特异的酶切位点，切割位点Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签，同时重组肠激酶（rEK）具有比天然酶更高的切割活性。重组肠激酶为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶，不含其他蛋白酶，可以在较宽pH范围（4.5-9.5）和较宽温度范围内有效切割融合蛋白，并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签，由于具有极高酶切活性，酶切反应使用量少，不影响下游蛋白应用，可不考虑除去。产品信息规格100U/200U/500U/1000U/5000U产品性质来源（Source）大肠杆菌表达分子量（MolecularWeight）理论值25.85kDa外观（Appearance）澄清、无色至淡黄色液体酶浓度（EnzymeConcentration）≥5U/uL活性定义（ActivityDefinition）一个活性单位定义为25°C，12-16h，在生物制药工业中，肠激酶用于生产重组蛋白质药物，通过专一性切割去除不需要的序列，提高药物纯度和活性。Recombinant Cynomolgus LILRB4/CD85k/ILT3 Protein,His Tag

糖苷内切酶 H 是一种重组糖苷酶，能够对 N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖结构进行切割。Recombinant Rat bFGF/FGF-2 Protein

胶原蛋白是哺乳动物体内含量多的功能性蛋白[1]。胶原蛋白由3条α链的多肽链亚基组成，α链自身构型为左手螺旋，三条α链又互相缠绕成右手螺旋结构，即胶原蛋白的“胶原域”[2]。胶原蛋白的一级结构分析结果显示，其肽链由(Gly-X-Y)n组成，其中X通常是脯氨酸，Y通常是羟脯氨酸[3]。按照胶原蛋白发现的先后顺序，可将其分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型等28种胶原蛋白[4]，Ⅰ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ)，主要分布于骨骼中[5]；Ⅱ型胶原蛋白由[α1(Ⅱ)]3组成，主要由软骨细胞产生，因其含有大量赖氨酸残基，因而糖基化率较高[6]；Ⅲ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅲ)]3，因含半胱氨酸所以肽链间形成二硫键，因此其本身就可形成细纤维，Ⅲ型胶原蛋白血管中含量较高，主要存在于肺泡间质中且分布杂乱，因而形成复杂的网状结构，正是这种结构使得肺组织具有良好的柔韧性与弹性，并且可以为细胞提供充足养分，使得皮肤饱满透亮[7]。Recombinant Rat bFGF/FGF-2 Protein