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RNA提取试剂基本参数
  • 产地
  • 苏州
  • 品牌
  • RNA提取试剂
  • 型号
  • 齐全
  • 是否定制
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RNA提取:预备工作(1)塑料制品:尽量使用一次性无菌塑料制品。已标明RNase-free的塑料制品,如没有开封使用过,通常不必再处理。处理的步骤如下:O在玻璃烧杯中注入去离子水,加入DEPC使其终浓度为0.05%~0.1%(DEPC-H2O)。(DEPC二乙基焦碳酸酯为活性很强的剧毒物,须在通风橱中小心使用)O将待处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中,注入DEPC-H2O,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通风柜中37℃或室温下处理过夜。O将DEPC-H2O小心倒入废液瓶中,将装有DEPC-H2O处理过的塑料制品的容器以铝箔封口,高温高压蒸汽灭菌至少30分钟。O灭菌塑料制品烘烤干燥,置洁净处备用。(2)玻璃和金属物品250℃烘烤3小时以上。植物花总RNA提取试剂盒:采用进口硅基质膜制作的总RNA吸附柱,配合特殊的提取缓冲液。北京RNA提取试剂进货价

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总RNA提取试剂是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围普遍,可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。样品在总RNA提取试剂中被充分裂解的同时能够较大限度地保证RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相,RNA分布在上清层中。收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,可用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、体外翻译等唐山正规RNA提取试剂厂家批发价Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,采用变性剂即内含异硫氰酸胍酚和β-巯基乙醇等变性物质。

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在细胞中,根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA(转运RNA),rRNA(核糖体RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白质的模板,内容按照细胞核中的DNA所转录;tRNA是mRNA上碱基序列(即遗传密码子)的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。细胞中还有许多种类和功能不一的小型RNA,像是组成剪接体的snRNA,负责rRNA成型的snoRNA,以及参与RNAi作用的miRNA与siRNA等,可调节基因表达。而其他如I、II型内含子、RNaseP、HDV、核糖体RNA等等都有催化生化反应过程的活性,即具有酶的活性,这类RNA被称为核酶。在病菌方面,很多病菌只以RNA作为其中的遗传信息载体(有别于细胞生物普遍用双链DNA作载体)。

常用总RNA提取试剂:异硫氰酸胍法和Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取较常用的方法,异硫氰酸胍法操作简单快捷,适用于样本足够大的常规动物组织;Trizol法裂解能力较强,尤其适合小样本及特别难提取的组织,如兔子皮肤,动物结缔组织等总RNA的提取;另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂,还可以用于植物组织、细菌、菌类等组织的提取。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还可以使用CTAB法进行总RNA的提取。提取RNA时我们经常遇到的问题是:(1)RNA产量较低;(2)RNA有严重的盐类污染;(3)RNA有严重的有机溶剂污染;(4)样品降解等问题。RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。

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昆虫RNA柱式提取试剂盒使用方法:将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rmp室温离心半分钟,弃穿透液。将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rmp室温离心半分钟,弃穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室温12000rmp离心半分钟,弃穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室温12000rmp离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。室温12000rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脱液,室温放置1~2分钟。12000rmp室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。细菌总RNA提取试剂盒:提取的总RNA纯度高,没有DNA和蛋白质污染,适用于RT-PCR。石家庄RNA提取试剂厂家

带口罩、帽子,屏住呼吸、不说话,带乳胶手套并要时常更换。北京RNA提取试剂进货价

经典Trizol法并不能获得总RNA:这个事实可能会刷不少新手甚至老手的三观,但确有实验支持:经典Trizol法会选择性丢失低GC比的miRNA。这一点,源自一则作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韩国鼎鼎大名的美女科学家,专做RNA相关的研究,包括miRNA。几年前她们组发现一个奇怪的“现象”,即贴壁细胞在消化之后,会有一些miRNA的丰度突然降低,看起来好像是被快速“降解”掉了,并据此写了一篇文章发到MolecularCell上。但很快她们就发现,这个“现象”难以重复:如果用Trizol做实验,就一定是阳性结果,而用试剂盒提RNA,就重复不出来。难道是号称能提总RNA的Trizol方案出了问题?确实如此。经进一步实验后发现,经典的Trizol方案会使得低GC比的miRNA丢失。北京RNA提取试剂进货价

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