众所周知,RNA提取是一项困难的工作。常见的挑战包括RNA降解、低产率和/或纯度以及DNA污染。此外,不同的样品类型有自己独特的特性,需要特别注意。例如,微生物(如革兰氏阳性/阴性细菌、菌类、古生菌等)的细胞壁坚硬,不易被化学和酶解。其他样本类型,如粪便和植物含有压制剂(如多酚类、腐殖酸/黄腐酸、单宁酸等),可与RNA共沉淀,并可压制下游分析,如RT-qPCR。RNA是不稳定的,极易降解。许多样品含有高水平的RNase,会快速降解RNA。为了使之较小化,较好在采集时稳定样本中的RNA。常用的样品稳定方法包括液氮快速冷冻、干冰乙醇浴或-80°C冷冻室。然而,这些方法也有缺点,如核酸的冻融损伤,并不是所有的研究人员在采集样品时都能立即使用这些方法。RNA存在于水相中。水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。郑州RNA提取试剂价格
尽管现有的RNA提取试剂都用压制RNase的成分,但提取的材料仍需谨慎处理。提取的材料的新鲜度是获取完整RNA的关键,但是由于种种原因无法立即从新鲜材料中提取RNA时,使用Takara公司的样品保护剂SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低温冰箱的不便,同时也可以有效解决组织、细胞样品的短时间保存及运输问题。此外,如果将不同时期收集的样品都预先存放于本试剂中,可以做到立即终止并固定RNA表达的时序变化,减少实验组间的误差,RNA提取试剂的选择:首先,要确定材料的可用性。贵阳RNA提取试剂厂家供应总共可以使用该试剂盒进行50次标准提取。
通用多糖多酚植物RNA提取试剂盒1、高纯度:试剂盒的进口吸附柱具有的专一吸附特性和强吸附力。三管齐下保证所提取RNA的产量和纯度,前期得到的高质量RNA才能保证后续实验成功,尤其是对荧光定量PCR实验等。2、无DNA污染可直接用于荧光定量PCR:目前市面上的试剂盒大多提出的RNA会出现DNA污染其结果严重影响后续实验,特别是非常灵敏的荧光定量PCR的实验。一些市面上单独卖的去DNA污染的试剂,效果不稳定,去除DNA污染不彻底。本产品操作简单,去除DNA彻底,得到的RNA样品可直接用于荧光定量PCR,反转录等各种后续实验。
对RNA的科学研究,首先要从植物或者动物等组织中提取出合格的RNA。在实际RNA提取中,有几个提取原则:1、保证RNA一级结构的完整性;2、提取的RNA样品中不应存在对酶存在压制作用的有机溶剂及过高浓度的金属离子;3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到较低程度;4、排除其它核酸分子(DNA)的污染。常用RNA提取方法有:1TRIzol法;2TRIzol+过柱法;3CTAB+过柱法;4试剂盒法。RNA提取试剂盒BiomarkerPlantTotalRNAIsolationKit(Polysaccharides&Polyphenolics–rich),能从植物组织,特别是富含多糖多酚或淀粉的植物组织(如成熟水稻叶片,棉花叶片,拟南芥种子,香蕉,马铃薯块茎,苹果,西瓜果肉,猕猴桃,梨,月季等)中快速提取总RNA,同时可以处理大量不同样品。根据它们在不同的PH值和不同极性溶剂的溶解度不同而使得分开。
目前,主流的RNA提取方法有Trizol法、离心柱法和磁珠法。其中,Trizol法与离心柱法相比,提取效果相当,但因其对操作者带来的毒性,现在越来越被弃用。磁珠法可以针对大批量样本处理,适合机器自动化提取,但是提取核酸纯度低,提取得率低,且使用成本较高。对于拭子RNA含量较低的样本或比较珍贵的样本或样本总数不是很多的实验室,选择的拭子RNA提取方法应是离心柱法。近来,随着基因诊断技术的发展,从口腔拭子、泌尿生殖道拭子、痰液等样本中进行RNA提取的试剂盒的应用价值越来越大,如tumour早期诊断、遗传病检测和病原体传染核酸检测等。拭子RNA提取效果在很大程度上取决于采样质量、试剂盒性能等,特别是试剂盒的性能较大影响了拭子核酸的基因检测和各种研究的开展。好的试剂盒价格比较贵,在实验室可以根据自己的实验需要来定夺试剂盒的使用。宁波RNA提取试剂平均价格
植物花总RNA提取试剂盒:可以从多糖多酚植物的根、茎、叶以及花组织中快速提取总RNA。郑州RNA提取试剂价格
RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染,故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆等。和进口品牌实验对照显示,公司的产品质量已经达到甚至超过了进口产品的质量。郑州RNA提取试剂价格
miRNA是一类内源性的约22个核苷酸的非编码RNA分子,可参与转录后的基因调控。在细胞的分化和发育,细胞信号转导和对传染的应答等生物学过程中,miRNA发挥了重要作用。成熟的miRNA主要通过翻译压制来调控内源性基因的表达。miRNA的应用有miRNA模拟物和压制剂。miRNA模拟物是化学合成的双链RNA分子,通过传染到细胞中,模拟成熟的内源性miRNA分子;miRNA压制剂是单链经过修饰的RNA分子,通过传染到细胞中,特异性的压制miRNA的功能。miRNA模拟物和压制剂可以用于研究单个miRNA错误调节所造成的生物学影响,也能用于确定某个miRNA分子的特异性靶标基因。同时有研究发现mi...