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鼠尾胶原胶凝程序：胶原蛋白I按以下步骤使其pH达到碱性时凝胶。1）将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。用氢氧化铵使纱布饱和，把盖子放在150mm的培养皿上，暂放置一边。2）将胶原蛋白I均匀涂布在要包被物的表面上，厚度可以根据需要改变，胶原蛋白I（50-100μL）足以涂覆22mm的盖玻片。对于直径100mm的培养皿，每个加入约6mL;对于60mm培养皿添加约2.3mL，对于35mm培养皿添加约1mL。3）将涂有胶原蛋白的盖玻片或带有盖子的培养皿转移到氨蒸气室并暴露三分钟。4）在无菌蒸馏水中（35mm培养皿加5mL，60mm培养皿加10mL等）浸泡涂布的盖玻片或培养皿30min。吸取原蒸馏水并加0.5-1.0mL无菌蒸馏水，放置在层流罩中过夜。5）吸出蒸馏水，用含血清的平衡盐缓冲液溶液代替并保存在2-8°C。开盖在超净台上过夜晾干，也可以在室温放置1小时后。无锡正规鼠尾胶原服务电话

鼠尾胶原包被培养板：胎干细胞在体外可诱导分化为血管内皮细胞,进而形成血管,因而成为血管组织工程理想的种子细胞来源之一。目的:探讨建立定向诱导人胚胎干细胞向血管内皮细胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上培养人胚胎干细胞H1,将H1细胞团块转移到鼠尾胶原包被的培养板,贴壁24-48h后,培养基换为含不同辅助因子和内皮细胞生长添加剂的EGM-2内皮细胞培养基。结果与结论:①在EGM-2内皮细胞培养基诱导下,细胞逐步表达内皮细胞特异性标记基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化细胞表达内皮细胞特异性标记VE-cadherin、CD31。③分化细胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。说明将人胚胎干细胞接种在鼠尾胶原包被培养板上,通过EGM-2内皮培养体系诱导,可直接分化为功能性血管内皮细胞。为研究胞外基质对诱导胚胎干细胞血管内皮细胞分化的作用以及相关信号分子机制打下了基础。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。深圳正规鼠尾胶原生产厂家鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便。

胶原蛋白的提取方法：酸法提取：酸法提取主要采用低离子浓度酸性条件浸渍处理原料，从而破坏分子间的盐键和希夫碱，而引起纤维膨胀、溶解。作为溶剂使用的酸，主要有盐酸或亚硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、柠檬酸和甲酸等。酸法是提取胶原蛋白比较常用和有效的方法，用酸法提取的胶原较大程度地保持了其三股螺旋结构。此法处理快速，所得产品的分子量是连续的，适用于医用生物材料及原料的制备，但产品得率低，设备腐蚀严重，污染重。赵苍碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下从牛腱中提取胶原蛋白，得到高纯度的胶原蛋白溶液。

胶原蛋白按其应用可以分为食品级、一般级、医药级。食用胶原一般来源于动物的真皮、肌腱和骨胶原．其中皮胶原是主要的食用胶原。食用级胶原通常外观为白色，口感柔和，味道清淡，易消化。胶原的独特品质．使得它在许多食品中用作功能物质和营养成分，具有其它替代材料无可比拟的优越性：①胶原大分子的螺旋结构和存在结晶区．使其具有一定的热稳定性；②胶原天然的紧密的纤维结构，使胶原材料显示出很强的韧性和强度，适用于薄膜材料的制备；③大较胶原被用作制造肠衣等可食用包装材料．其独特之处是：在热处理过程中．随着水分和油脂的蒸发和熔化．胶原几乎与肉食的收缩率一致。而其他的可食用包装材料还没被发现具有这品质。吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）。

详细步骤如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；2.将尾巴剪开、去掉皮毛，并剪成小段（3cm左右），抽出银色的尾键；3.把剪碎的尾键置于150ml，0.1％消过毒的醋酸中，4℃放置，并不时振荡；4.48h后取上清，4000转离心30min后，取上清；5.分装上清（鼠尾胶）4度（或-20度）保存。有时可继续向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重复以上步骤，以制备更多的鼠尾胶。在使用时，先将冰存的胶原液在室温下解冻，再按以下步骤包被培养器皿：1）用吸管吸取胶原液，在无菌的培养器皿的生长面内壁上均匀地涂上薄薄的一层胶原溶液。2）若包被的是培养瓶，可向培养瓶通入氨气或用浸有氨水的棉球封口片刻。让氨气充入瓶内后，即可旋紧瓶盖或塞紧瓶塞。若为培养皿或板的话，可将培养皿或板放在已消毒的饭盒内，将浸有氨水的棉球放入饭盒内，盖紧饭盒盖，四周用封口胶封死。一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法，采用酸法与酶法相结合的工艺。南昌正规鼠尾胶原厂家供应

4°C沉淀10小时，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀。无锡正规鼠尾胶原服务电话

鼠尾胶原备用胶凝程序：1）在冰上放置以下物品：胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1MNaOH。2）确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3）在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4）在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS（终体积/10）mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积（不要添加到管中直到步骤4.6为止）终体积x终胶原蛋白I浓度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的胶原体积×0.023）mL的无菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水：添加蒸馏水体积=V（终）—V（胶原蛋白）—V(10×PBS）—V（1MNaOH）4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积，混匀，冰上备用。5）胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6）使用时，无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。无锡正规鼠尾胶原服务电话

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