传统的化学发光免疫分析(CLIA)多为异相,需要固相包被和洗涤。均相化学发光免疫分析则通过精巧设计免除了这些步骤。一种常见策略是使用空间位阻或能量转移淬灭。例如,将化学发光标记物(如吖啶酯)标记在一种抗体上,将淬灭剂或另一种能淬灭其活性的物质标记在竞争抗原或另一种抗体上。在未结合状态下,两者靠近,化学发光被淬灭或无法有效触发。当样本中的目标抗原与体系竞争结合,解除了这种淬灭效应,化学发光信号得以恢复。另一种策略是利用酶片段互补:将化学发光酶(如荧光素酶)分割成无活性的两个片段,分别标记在相互作用的分子对上,结合后酶活性恢复,催化底物发光。这些设计实现了在复杂样本中直接进行免疫定量。均相化学发光在自身免疫性疾病诊断中的作用大吗?广东体外诊断均相发光免疫诊断试剂

均相发光技术正逐步应用于食品安全和环境监测等多应用领域。例如,检测食品中的毒(如黄曲霉素)、抵抗细菌药物残留或病原菌等。通过设计针对这些污染物的抗体或适配体,并将其与均相化学发光信号系统偶联,就可以开发出快速、高通量的筛查方法。相较于传统的色谱或微生物学方法,均相化学发光技术具有检测更快捷,适合大批量样本的初筛的特点。在环境监测中,常常可用于检测水中的重金属离子、有机污染物等,具有现场快速分析的潜力。江苏体外诊断均相发光的原理体外诊断行业新星,均相化学发光,助力企业快速发展!

GPCR是比较大的药物靶点家族,其功能研究涉及配体结合、第二信使产生、下游信号通路活化等多个层面。均相发光技术多方面渗透于此领域。对于配体结合竞争实验,可采用TR-FRET,将受体标记供体,配体标记受体。对于GPCR活化后比较关键的cAMP积累或IP3/DAG产生,均有成熟的均相检测试剂盒。例如,cAMP检测常采用基于抗体竞争原理的均相发光免疫分析。细胞裂解后,内源性cAMP与加入的标记cAMP竞争结合有限量的抗cAMP抗体。抗体结合事件通过FRET或Alpha技术被检测,信号强度与内源性cAMP浓度成反比。这类方法直接在细胞裂解液中进行,快速、灵敏,完美契合GPCR激动剂/拮抗剂的高通量筛选。
激酶是重要的药物靶点,其活性检测是药物筛选的关键。均相发光技术,尤其是TR-FRET和Alpha技术,为此提供了理想平台。以TR-FRET为例:将待测激酶、底物肽、ATP与待筛选化合物共同孵育。体系中包含两种抗体,一种针对磷酸化底物(带供体标记),另一种针对底物肽的标签(带受体标记)。只有当激酶活性正常,底物被磷酸化后,两个抗体才能同时结合到底物肽上,使供受体靠近产生FRET信号。若化合物能抑制激酶,则磷酸化水平下降,FRET信号减弱。这种方法无需分离,可直接在含有ATP、激酶和化合物的混合液中实时或终点法检测,通量极高,是发现激酶抑制剂的主流手段。均相化学发光在 POCT(即时检验)领域的应用现状?

生物发光共振能量转移(BRET)是一种天然的或工程化的均相检测技术。它利用生物发光蛋白(如海肾荧光素酶Rluc)作为供体,催化底物(如腔肠素)产生化学发光,该能量直接转移给邻近的荧光蛋白(如GFP、YFP)受体,使其发出荧光。BRET无需外部光源激发,完全消除了光散射和自发荧光的背景,信噪比极高。在活细胞研究中,可将Rluc和荧光蛋白分别与两个可能相互作用的靶蛋白融合,通过监测BRET信号来实时、动态地研究蛋白互作的空间接近性和动力学,是研究GPCR二聚化、信号转导复合物组装的强大工具。降本增效新方案,为您节省实验成本!江苏均相化学发光均相发光应用领域
均相化学发光技术的检测流程是怎样的,复杂吗?广东体外诊断均相发光免疫诊断试剂
蛋白质错误折叠和聚集与阿尔茨海默病、帕金森病等密切相关。均相化学发光方法可用于监测聚集过程。例如,将待研究的蛋白(如β-淀粉样蛋白、α-突触蛋白)分别与化学发光供体(如鲁米诺衍生物)和受体(如荧光染料或淬灭剂)标记。当蛋白处于单体状态时,两者距离较远,信号弱;当发生聚集时,不同标记的分子被纳入同一聚集体,供体与受体靠近,通过CRET或淬灭效应导致信号特征改变。该方法可实时监测聚集动力学,并用于筛选能抑制聚集的小分子化合物。广东体外诊断均相发光免疫诊断试剂
评估疫苗免疫效果或康复者血清中和能力的关键是病毒中和抗体检测。传统的空斑减少中和试验(PRNT)耗时费力。基于假病毒系统的均相发光中和试验已成为高通量替代方案。将表达荧光素酶的报告基因包装进假病毒颗粒(携带目标病毒的囊膜蛋白)。当假病毒炎症细胞时,会驱动荧光素酶表达。如果样本中存在中和抗体,则会阻断炎症,导致荧光素酶信号下降。检测时只需在炎症后裂解细胞并加入发光底物,即可实现快速、定量、高通量的中和抗体滴度测定,在COVID-19等疫病中发挥了重要作用。均相化学发光技术在临床检验中的普及程度。广东均相化学发光均相发光技术激酶是重要的药物靶点,其活性检测是药物筛选的关键。均相发光技术,尤其是TR...