在流式细胞术中的优化HEPES(10 mM)可维持细胞悬液pH稳定,减少荧光染料淬灭。但需与FBS或BSA联用以防止非特异性结合。HEPES缓冲液能减少细胞聚集,提高流式分析的准确性。在长时间流式实验中,HEPES可替代碳酸氢盐缓冲液,避免因CO2逸出导致的pH漂移。HEPES的低离子强度特性减少了对细胞膜的损伤。HEPES缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%,优于Tris缓冲液。但高温(>50℃)会导致降解,需避免高压灭菌。HEPES在低温下仍保持良好缓冲能力,适合冷库或冰上操作。在热稳定性实验中,HEPES缓冲液能有效维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES在高温下的降解产物可能干扰实验结果。国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A询价。广西高纯HEPES药用采购

HEPES是一种两性离子缓冲剂,化学式为C8H18N2O4S,分子量238.3g/mol。其pKa值为7.5(25℃),在pH6.8-8.2范围内具有优异的缓冲能力。作为Good's缓冲液家族成员,HEPES对细胞无毒性,且不与金属离子螯合,适合含金属离子的实验体系。其水溶性(>1M)和低渗透压特性使其成为细胞培养的理想选择。HEPES在细胞培养中的应用HEPES***用于哺乳动物细胞培养,尤其在CO2培养箱外操作时(如显微镜观察),可替代碳酸氢盐缓冲系统。推荐浓度为10-25 mM,过高浓度可能抑制细胞生长。需注意HEPES对光敏感,需避光保存。河南高纯度HEPES市场价格国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A购买。

(5)缓冲溶液在稳定性方面各显利弊:①Tris-HCl缓冲溶液pH值受外界影响较大,一般现用现配。同时需要注意Tris是一级脂肪胺,分子结构中的氨基易与醛类化合物发生缩合反应,是一些生化实验的抑制剂。②硼酸盐缓冲液有一定毒性,不宜用做注射液或者口服液的缓冲液。③虽然磷酸盐缓冲溶液稳定性很好,但磷酸根具有一定的络合能力会抑制一些与金属离子有关的生化反应。④HEPES缓冲溶液是较理想的生物缓冲剂,但其有多种生物学效应,如:缩短血液凝固时间、减缓平滑肌收缩频率以及阻断细胞膜上的阴离子通道等,在一定程度上会影响患者身体状态,使用时应需注意。
缓冲溶液在生物化学方面的应用非常重要。磷酸盐缓冲溶液、硼酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液、HEPES缓冲溶液等都是常见的缓冲体系,并且在生化实验和生产过程中使用。磷酸盐缓冲溶液由二氢磷酸盐和一氢磷酸盐组成,其缓冲范围可在pH5.8至pH8.0之间工作,适合于大多数蛋白质的研究。硼酸盐缓冲溶液由硼酸和其相应的盐(如Na2B4O7)组成,适合细胞外液pH范围内的缓冲作用。Tris-HCl缓冲溶液以Tris(三羟甲基氨基甲烷)为主要成分,缓冲范围在pH7.0至pH9.0之间,适合于许多生化实验。HEPES缓冲溶液是一种弱碱性的缓冲溶液,具有良好的缓冲性能和生物相容性,适用于在pH7.2至pH8.5范围内的实验。总之,缓冲溶液在确保生物化学反应的可重复性、准确性和有效性方面发挥着重要作用。通过选择适当的缓冲体系及其浓度可以调整溶液的pH值,从而确保生化反应在所需的酸碱环境下进行。在生物制剂的生产和质量控制中,缓冲溶液同样起着至关重要的作用。国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A。

4. 在电生理实验中的关键作用HEPES常用于膜片钳实验,其低离子强度特性可减少电流噪声。建议与NaCl、KCl等电解质配合使用,终浓度不超过20 mM以避免膜电位干扰。5. 蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液(pH 7.5)适用于离子交换层析,因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用,以防金属离子沉淀。光敏感性与储存条件HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。注射用HEPES 中美双报。河北备案登记号HEPES需求
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与温度变化的稳定性HEPES缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%,优于Tris缓冲液。但高温(>50℃)会导致降解,需避免高压灭菌。HEPES在低温下仍保持良好缓冲能力,适合冷库或冰上操作。在热稳定性实验中,HEPES缓冲液能有效维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES在高温下的降解产物可能干扰实验结果。在RNA研究中的注意事项HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。HEPES在RNA电泳中常用作缓冲液,其低离子强度减少了对RNA迁移的干扰。在体外转录反应中,HEPES缓冲液能维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES可能结合某些金属离子,影响依赖金属离子的RNA酶活性。广西高纯HEPES药用采购