4. 在电生理实验中的关键作用HEPES常用于膜片钳实验,其低离子强度特性可减少电流噪声。建议与NaCl、KCl等电解质配合使用,终浓度不超过20 mM以避免膜电位干扰。5. 蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液(pH 7.5)适用于离子交换层析,因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用,以防金属离子沉淀。光敏感性与储存条件HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A集中采购;江苏辅料HEPES

伊立替康**早上市的制剂是盐酸伊立替康注射液,在实际使用的过程中,该剂型逐渐暴露出一个问题:伊立替康的内酯环结构易水解,在pH>6条件下平衡快速向羧酸盐型方向转化。羧酸盐型的伊立替康药理活性低,毒性更强。生理条件(pH 7.4)下,由于血清蛋白优先与羧酸盐络合而使平衡偏向活性低的羧酸型,造成有效的内酯型比例过低,达到平衡时,“低效高毒”的羧酸盐形式化合物所占比重高达90%。
q中包裹的伊立替康以有效的内酯型为主,这也意味着伊立替康脂质体内水相pH偏酸性(pH6左右)。而众多文献及Onivyde专利文件实施例均表明外水相pH在近中性时更有利于脂质的稳定,Onivyde专利文件的实施例表明外水相pH在7.25左右时脂质长期稳定性比较好。这需要伊立替康脂质体外水相和内水相存在pH差异,同时外水相偏碱性的缓冲对不能在长期储存中进入内水相升高内水相pH,否则内水相中的伊立替康将会转化为“低效高毒”的羧酸盐形式。四、不易穿过脂质膜的羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)更适用于伊立替康脂质体而羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)作为一种不易穿过生物膜的缓冲对,可以在稳定脂质体外水相pH为弱碱性的同时,不改变内水相酸性pH,非常适用于伊立替康脂质体。 江苏辅料HEPESGMP条件下生产注射级HEPES!

HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是基于其两性离子特性和稳定的缓冲能力。以下是具体解释:对细胞的保护作用降低细胞毒性:某些化学物质在培养基中容易产生细胞毒性,影响细胞的生长和繁殖。HEPES能够降低这些化学物质的细胞毒性,从而保护细胞免受损伤。形成保护层:HEPES分子还可以通过吸附在细胞表面,形成一层保护层,减少细胞间的摩擦和碰撞,降低细胞的损伤风险。这有助于提高细胞的生存率和实验结果的可靠性。
HEPES药用辅料
与其他的缓冲体系相比,HEPES突出的优势有以下几点:
1. pKa 和 buffer 比较稳定,随温度的变化很小。
2. HEPES 的缓冲能力不会与受其他离子的影响,同时HEPES本身也不会对其他离子的功能造成影,HEPES拥有性质稳定性。
3. 细胞培养基中pH的稳定性主要依靠培养基中的碳酸氢盐和5%的CO2共同维持。当细胞处于开放环境时,二氧化碳的弥散会导致pH上升脱离生理pH范围。可是添加HEPES缓冲对的培养基则不存在这方面问题。
4. HEPES不干扰细胞内的生化反应因为它不易穿过生物膜,因此它更适用于伊立替康脂质体。 GMP条件下生产AVT稳定供货注射级HEPES。

伊立替康在制剂中易受pH影响,容易转化为羧酸盐型,而这种形式的药理活性较低,毒性更强,因此需要尽可能保持有效的内酯型。同时,脂质体制剂对于内外水相的pH差异也提出了一定的要求,需要保持外水相稍碱性,同时内水相保持酸性。在这种情况下,选择合适的缓冲剂尤为重要。羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)因不易穿过生物膜,可以稳定脂质体外水相的pH为弱碱性,同时不改变内水相的酸性pH,因此非常适用于伊立替康脂质体。在制剂研发中,需要考虑到伊立替康的化学性质、脂质体制剂的特点以及合适的缓冲系统,以保证制剂的稳定性和药效。因此,通过科学的配方设计和严格的制备工艺,有望解决伊立替康在制剂中的稳定性问题,从而保障药物的疗效和安全性。注射用HEPES缓冲液中美双报实验室集采;浙江羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES现货供应
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与温度变化的稳定性HEPES缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%,优于Tris缓冲液。但高温(>50℃)会导致降解,需避免高压灭菌。HEPES在低温下仍保持良好缓冲能力,适合冷库或冰上操作。在热稳定性实验中,HEPES缓冲液能有效维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES在高温下的降解产物可能干扰实验结果。在RNA研究中的注意事项HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。HEPES在RNA电泳中常用作缓冲液,其低离子强度减少了对RNA迁移的干扰。在体外转录反应中,HEPES缓冲液能维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES可能结合某些金属离子,影响依赖金属离子的RNA酶活性。江苏辅料HEPES