我用的是3500g,4度离心,时间可以自己控制,取决于你之后的浓缩体积,我一般是200ul左右。千万别一下离心时间太长,不同的蛋白浓缩的速度不同,有的需要长时间离心,有的则一下子就好。当然也和你的蛋白是否比较纯,所用的是什么buffer,还有蛋白的浓度有关系。所以离心时要先短些时间观察一下你的浓缩速度,不要一下子浓缩过了,甚至形成沉淀就得不偿失了。另外其实他们的管子都设计的是一次性使用,所以如果想重复使用,不要离得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重复使用时要看看管壁上有没有裂纹,现在的管子好像不如从前的结实了。超滤离心管可以用于分离提取海洋样品中的藻类、细菌等微生物群落,以进行海洋生态学研究。嘉兴再生纤维素离心管定制
离心过滤器具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至60分钟,这取决于标称分子量限值(NMWL)。竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至较低,过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集,而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。该装置可在摆桶或定角转子中旋转。装置未经消毒,只供—次使用。温州外泌体超滤离心管报价使用超滤离心管时应注意避免污染和交叉传播,并对设备进行彻底清洁消毒。
脱盐、更换缓冲液或渗滤是从含有生物分子的溶液中去除盐分或溶剂的重要方法。盐分去除或缓冲液更换可通过超滤管来完成,具体过程是浓缩样本,弃去滤出液,然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂,恢复到样本原先的体积。"洗出"的过程可反复进行,直到杂质的浓度被充分降低。关于超滤管的常见问题与解答:Q:超滤管的膜材质是什么?A:超滤管的膜材质为默克密理博特有的Ultracel再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而准, 蛋白吸附损失小。Q:如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?A:按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差 一个数量级(10倍)。
超滤离心管的分子量选择:按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管,为了得到较高的收率,所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右,不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径,膜上的孔并非均匀,离心高压下也可能渗漏,因此截留孔径越小,流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大,可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质,可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心,重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心,虽然优良品质的产品都有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩,体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。使用超滤离心管时要注意控制转速,以避免过度旋转导致超滤膜损坏或溢出样品。
超滤离心管关于回收率的疑问?一般对浓度大于0.1mg/ml的溶质进行回收,回收率在90%以上。通常,样品损失是由于滤膜表面和料管表面的非特异性吸附造成的。为了获得较高的回收率,所选滤膜的截留率约为目标蛋白的1/3。超滤膜是一种非对称膜,其孔径呈正态分布。在高压离心下也可能发生泄漏,在这种情况下蛋白质可能会发生变形。因此,截留孔径越小,流速越慢,但回收率会更高。浓缩过程中有蛋白质沉淀,如何处理?如果蛋白质浓缩过快或过多,都可能造成蛋白质沉淀,浓缩后的蛋白质之后浓度不宜过高;对于对浓缩速度敏感、易沉淀的蛋白质,建议改进方法如下:1)降低离心速度,2)使用截留分子量较大的超滤膜3) 吹吸浓缩管,然后离心。使用超滤离心管时应注意避免与酸、碱等化学物质接触,以免损坏其结构和性能。衢州30K超滤离心管品牌
超滤离心管在食品安全监测中也具有重要意义,如检测水产品中的重金属等有害物质。嘉兴再生纤维素离心管定制
超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是溶液在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管?1. 使用角转子加到超滤装置上,较大样本量为15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时,将薄膜面板朝上定位,较大旋转 5000 xg,旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质,在过滤装置的底部插入一个移液管,通过左右扫动的方式将样品抽离,以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明:为达到较佳回收率,离心后应立即取出浓缩样品。嘉兴再生纤维素离心管定制