离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液盛放在离心管中在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(如细胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离。而离心管就是离心试验中必备的实验耗材之一。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上,蒸馏水彻底冲洗柱子,再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用,需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。超滤离心管的优点包括速度快、效率高、易于操作和清洗等。河北100K超滤离心管选择
A(聚酰胺):这种材质是PP和PE材质的聚合物,半透明,化学性质非常稳定,单不耐高温。PF(聚氟):半透明,可以低温使用,如果是-100℃-140℃下的实验环境,就可以用这种材质的离心管。CAB(醋酸丁酯纤维素):透明,可用于较稀的酸、碱、盐,以及酒精、蔗糖的梯度测定。PS(聚苯乙烯):透明,硬度大,对大多数的水溶液稳定,但是会被多种有机物腐蚀,多用于低速离心,而且一般是一次性使用。离心管分类:按材质可分:塑料离心管、玻璃离心管和不锈钢离心管等。按速度可分:低速离心管和高速离心管。按容量可分:微量离心管、小容量离心管和大容量离心管。一般称容量大于100mL的离心管为离心瓶。辽宁蛋白分离离心管在哪买超滤离心管通常有不同孔径大小的超滤膜供选择,以便过滤出不同大小范围内的目标分子。
超滤离心管的分子量选择:按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管,为了得到较高的收率,所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右,不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径,膜上的孔并非均匀,离心高压下也可能渗漏,因此截留孔径越小,流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大,可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质,可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心,重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心,虽然优良品质的产品都有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。
市场上常见离心管主要分为两种:即:塑料离心管 和玻璃离心管,也有少数是钢制离心管。使用玻璃管时离心力不宜过大,需要垫橡胶垫,防止管子破碎,高速离心机一般不选用玻璃管。离心管盖子封闭性不够好,液体就不能加满(针对高速离心机且使用角转子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染转子和离心腔,影响感应器正常工作。超速离心时,液体一定要加满离心管,因为超离需要抽高真空,只有加满才能避免离心管变形。而钢制离心管强度大,不变形,能抗热,抗冻,抗化学腐蚀,它的应用也是相当普遍但使用时同样也应避免接触强腐蚀性的化学药品,如强酸、强碱等。尽量避免这些化学物质的腐蚀。超滤离心管适用于从细胞培养基、血浆、尿液等样品中分离蛋白质、核酸、多糖等大分子化合物。
选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。超滤离心管还可以用于浓缩样品,减少其体积并提高浓度。嘉兴蛋白分离离心管厂商
使用超滤离心管时应注意保持其稳定性并避免操作失误导致实验失败或损坏设备。河北100K超滤离心管选择
实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得较多,因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观地看到样品的离心情况,但是比较容易变形,抗有机溶剂的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。因此,实验室一般会经常购买离心管。PC (聚碳酸酯):透明度较好,硬度大,可以高温消毒,但不耐强酸强碱以及一些有机溶剂如酒精之类。主要用于5万转以上的超高速离心。PE(聚乙烯):不透明。和丙铜、醋酸、盐酸等不反应,较为稳定,高温下容易变软。PP(聚丙烯):半透明,化学及温度稳定性较好,但是在低温下会变脆,所以在离心时不要在4℃以下。河北100K超滤离心管选择