转印膜用于蛋白质和核酸的转移和检测过程,主要分为:正电荷尼龙膜/硝酸纤维素膜/PVDF膜(Positively charged nylon/Nitrocellulose/PVDF membrane)。已知的结合力包括疏水作用力\H键\静电作用力等,确切的结合原理并不明确,主要靠假说来支撑.主要有两种假说:1 首先两者靠静电作用力结合, 然后靠H键和疏水作用来维持长时间结合.2首先两者靠疏水作用结合, 然后靠静电作用来维持长时间结合.两条假说, 都表明其结合过程分为两步, 首先结合和后面长时间结合.由于结合原理的不明确性, 导致在这方面的工作非常依赖实践经验。使用PVDF转印膜进行转印具有较低的成本。河北蛋白吸附转印膜订做
PVDF 是一种半结晶含氟聚合物,与 PTFE 相比具有更复杂的内部结构。它由交替的 CH2和 CF2单体组成,具有良好的耐化学性和机械强度。 PVDF 膜的内部结构可能因制造工艺而异,它通常比 PTFE 膜更具有均匀和对称的孔结构,所以在准确过滤方面占一定的优势。2.耐化学性PTFE 以其出色的耐化学性而闻名,使其适用于极端环境和腐蚀性化学品。 PVDF转印膜还具有良好的耐化学性,但对某些化学品(如强碱和氧化剂)的耐受性不如 PTFE膜。3.热稳定性PTFE 的热稳定性高于 PVDF,连续使用温度范围为-200C 至260C(-328F 至500F)。 PVDF 的温度范围较低,通常约为-40C 至150C(-40F 至302F),因此不太适合高温应用。深圳纯硝酸纤维素膜价位膜材料具有长久效用和优异的稳定性。
随着膜孔径减小,膜的实际可用表面积递增,膜结合蛋白的量也递增. 估量表面积的参数为表面积比率(实际可用表面积与所用膜平面积的比率).另外, 膜孔径越小,层析速度也越小,那么金标复合物通过T线的时间也就越长,反应也就越充分.综合以上两点,结论为膜孔径越小灵敏度越高.但是同时也减慢了跑板速度,增加了非特异性结合的机会,也就是假阳性越高.所以要按照试验结果挑选适合实际项目的膜,找到合适的平衡点。首先,单克隆抗体与膜的结合优于多克隆抗体, 主要时由于多克隆抗体有很多不同的表面位点, 而各位点与膜的较佳结合条件都有细微的差别, 毫无疑问就增加了优化难度。其次,分子量越大,蛋白越难结合到固相材料上。
硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,虽然这其中的机制还不是十分清楚,但由于硝酸纤维素膜(NC膜)的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了普遍的应用。在非离子型的去污剂作用下,结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小,要选择不同孔径的硝酸纤维素膜(NC膜)。因为随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。但是膜孔径如果小于0.1mm,蛋白的转移就很难进行了。转印膜的使用范围和应用场景不断扩大,具有广阔的市场前景。
硝酸纤维素膜/PVDF膜:用于蛋白免疫印迹的固相载体有多种,硝酸纤维素膜及PVDF(聚亚乙烯双氧化物)膜较为常用。硝酸纤维素膜具有结合 能力强,膜不需要活化,背景浅,能进行多次免疫检测并且功能基团寿命长等优点,但极易破碎不易操作。PVDF膜在制备多肽供蛋白质化学分析中较为常用。它 具有较强的蛋白质结合能力和高信噪比,所以不会因为重复使用探针而使蛋白质丢失。另外,膜的开放孔结构使其更容易与被吸附的蛋白质结合。可用于Western杂交、dot/slot 杂交、蛋白质测序、以及MS分析。适用于Southern/Northern/Dot/Slot Blot/Colony Lift实验和Western、蛋白质测序以及MS分析。PVDF转印膜材料能够在复杂工艺和高温环境下保持稳定。上海带电尼龙膜排行榜
PVDF转印膜是一种高性能转印膜。河北蛋白吸附转印膜订做
经常使用的封闭手法有两种:流动封闭,将作用物质处理在样品垫上。膜上定点封闭,将作用物质配成溶液喷点在膜的特定位置上. 该方法需要使用BIODOT的AIRJET喷头.可以将不合格的半成品大板重新复活。只要是将封闭做在了膜上,就必然会对产品的稳定性造成影响.具体的影响程度要通过稳定性测试来评判。刚生产出的膜一般含有5-10%的水分. 关于膜的老化机理,有个理论支持,不过争议比较大. 理论认为:膜的老化是因为膜上的水分蒸发,使膜变得疏水,带电荷并变脆. 储存膜一般要求是避光,密封.过干或过湿都不利.在这种保存条件下,一般可以放置两年. 但是如果膜上做了封闭处理,就要根据具体试验情况来判断了.有些膜由于生产工艺的问题,使用后灵敏度会在一段时间内发生变化,遇到这种问题,就需要在点膜后放置一段时间,待稳定后方可进入调试生产。河北蛋白吸附转印膜订做