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疾病动物模型建模基本参数
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疾病动物模型建模企业商机

目前鉴定出15个外显子,外显子1起始密码为atg,外显子15的终止密码子是tga(转录本:)。pirb蛋白属于i型跨膜糖蛋白,包含由六个免疫球蛋白样结构域(domain,d)组成(d1-d6)的胞外段,一个疏水的跨膜段,三个免疫受体酪氨酸依赖的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一个itims样序列组成的胞内段。理论上讲,pirb的分子量约为92kd,但是western-blot分析中,pirb经常位于105kd处,因为pirb是糖蛋白。以往研究发现,pirb在免疫系统和中枢调节中均发挥重要作用。在免疫系统中,pirb在许多造血细胞都有表达,包括b细胞、肥大细胞、巨噬细胞、粒细胞和树突细胞,但是在胸腺细胞、成熟的t细胞和自然杀伤细胞不表达。动物模型的意义和优越性!宝山区生殖疾病动物模型建模

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急性肺损伤模型大鼠(右图)与对照组大鼠(左图)肺组织HE染色6.模型又名支气管。支气管是由多种细胞及细胞组分参与的慢性气道炎症,此种炎症常伴随引起气道反应性增高,导致反复发作的喘息、气促、胸闷和/或咳嗽等症状,多在夜间和/或凌晨发生,此类症状常伴有而多变的气流阻塞,可以自行或通过而逆转。6.1小鼠模型建立SPF级Balb/c雌性小鼠,体重约20g。采用OVA致敏诱导建立模型。OVA致敏诱导的模型:分别于第1、8、15天腹腔注射OVA混悬液(含OVA1g/L,氢氧化铝5g/L)0.2ml,实验第21天起将小鼠置于雾化激发器内,给予2%OVA生理盐水雾化激发宝山区生殖疾病动物模型建模这类动物疾病模型是指各种疾病共同性的一些病理变化过程的模型。

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疾病动物模型是指医学研究中建立的具有人疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。关于动物模型的研究就是有关实验动物的应用科学,研究各种模型动物的生物学特性和疾病特点,进而研究动物疾病发展过程。实验动物模型的建立,是用人为的方法,使动物在一定的治病因素(物理的、化学的、生物的)作用下,造成动物组织、或全身一定程度损害,出现某些类似动物疾病的功能、代谢、形态结构方面的变化或各种疾病,通过这种手段来研究动物疾病的发生、发展规律,为研究动物疾病的预防、(包括新药物试用)提供理论依据。

f1代小鼠southern印记的5’探针引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印记的目标片段大小如下:5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步骤c、采用限制性内切酶bamhi和avrii对dna进行切割;琼脂糖凝胶电泳分离dna;步骤d、将dna转到尼龙膜上;步骤e、探针变性后,与dna分子进行杂交,nbt/bcip化学显色法显色,拍照观察。southern杂交结果如图6所示,可以看到:6、8、9号pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割,在,wt小鼠只在,如果被avrii切割,pirb基因敲除小鼠在,wt小鼠只在。步骤6、将f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子pirb基因敲入小鼠,即为本发明所述小鼠pirb基因敲入的动物模型。将本发明获得的动物模型f2代纯合子小鼠与同品系小鼠组织/细胞特异性cre表达的小鼠杂交,获得f3代小鼠,可以实现在不同组织或者细胞类型中敲入pirb基因。对f3代小鼠进行基因型的鉴定:含有无(pirb-cwt)、一个(pirb-chet)或者两个。大量的遗传变异可作为研究人类疾病的借鉴。

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即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于,步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是:本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法,本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。必须真正了解研究者感兴趣且需要的小鼠疾病模型。宝山区生殖疾病动物模型建模

避免了在人身上进行实验所带来的风险。宝山区生殖疾病动物模型建模

动物模型名称:胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:5周5、实验动物体重:200~220g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:用胆管结扎法。大鼠按10mg/kg体重腹腔注射3%戊巴比妥钠麻醉,腹部皮肤消毒,无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔,分离出胆管,在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准:肝脏病理切片镜下小胆管伴纤维组织增生积分按程度为0-3分:0分:无明显病变;1分:呈局灶性分布,受累面积在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面积在30%-70%之间者;3分:呈弥漫性分布,受累面积在70%以上者。统计分析:每份标本在低倍视野(10×10)下依次选取左上、右上、左下、右下、中间5个视野(共1.5mm2)进行观察,测定并计算视野内小胆管伴纤维组织增生总面积。宝山区生殖疾病动物模型建模

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