细胞培养是很多下游实验的基础,细胞培养的好坏会直接影响后续实验的成功和稳定,而胎牛血清作为细胞培养的主要试剂对实验的重要性不言而喻!胎牛血清是细胞培养中常用的天然培养基,因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低,且含有丰富的细胞生长必须的营养成份,故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到医治作用。是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。南通进口胎牛血清哪里有
血清的保存应该注意:血清中的沉淀物、絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理,显微镜下"小黑点"。经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染,一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量。南通进口胎牛血清哪里有血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年。
那么如何保障胎牛血清的品质呢:内有毒的,内有毒的含量越低的血清,胎牛血清级别就越高:内有毒的≤10EU/ml时,此血清为特级胎牛血清;10EU/ml<内有毒的≤ 25EU/ml时,此血清为优级胎牛血清;内有毒的≥ 25EU/ml时,此血清为标准级胎牛血清;应选取内有毒的含量低的胎牛血清,使培养的细胞更健康。如果选取内有毒的较高的血清,细胞一直泡在“毒液”里,短期内细胞看不出太明显的变化,但长期的话细胞会衰老得较快,从而对实验结果造成严重影响。微生物:微生物包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原毒等。严格的生产工艺可以对细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。同时3次0.1um过滤可以完全祛除支原体(支原体直径0.2~0.3um)。通过病毒的检测,可以严格控制牛腹泻、牛细小、蓝舌病等病毒。通过非疯牛病疫区生产还可避免朊病毒。
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性;支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线(接种浓度)较为大增殖浓度≥2.5×106 个/ml;细胞倍增时间 ≤15h;克隆率 ≥85%。血清提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。
很好的胎牛血清:免疫球蛋白,国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。含量,此外,的使用也是要考虑在内的。国内外的血清,都不对进行测试(无四环素胎牛血消除外)。其中,由于国外使用较为严格,用量有限,同时每头奶牛的产品包括血清都可以追溯源头,所以国外胎牛血清不含或者含量极低。但是国内由于使用普遍,血清中残留量很高,导致国产血清质量很差,不利于细胞培养。胎牛血清提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。南通进口胎牛血清哪里有
牛血清是细胞培养中用量较为大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份。南通进口胎牛血清哪里有
胎牛血清的整个生产流程可以分为原料采集,原料加工以及冷链运输。原料采集作为胎牛血清整个生产流程的第一步也是关键的一步,对产品的较为终质量起了决定性的影响。采集过程一般要求在各个血源地相关部门认证的农场现场采集胎牛血浆,以确保采集对象为兽医监管下经临床检查为健康的动物。同时,整个采集的过程还需要在无菌环境下进行,一些很好的供应商甚至提供了全封闭的采集系统,彻底避免血清与空气的接触,这样较为终的血清产品内的内有毒的以及血红蛋白等成分才会维持在一个极低的水平,确保了获取的原始血浆质量。采集到了很好的原料,下一步就是对采集到的原料进行加工。原料到加工往往会涉及运输的过程,由于生物制品需要冷链运输的特殊性,在原产地直接对原料进行加工是较为理想的情况,这样可以较为大程度地避免交叉污染。南通进口胎牛血清哪里有
胎牛血清作为细胞培养的重要组成部分,能够提供细胞所需的营养物质和生长因子,为生物制药过程中的细胞培养提供了必要的条件。通过合理使用胎牛血清,可以提高细胞的生长和产量,从而提高生物制药产品的产量和质量。综上所述,胎牛血清在细胞培养中具有重要的应用价值。它能够提供细胞所需的营养物质、生长因子和细胞因子,促进细胞的生长、增殖和分化。胎牛血清在细胞研究和生物制药领域的应用普遍,为细胞研究和生物制药的发展做出了重要贡献。然而,由于胎牛血清的来源和成分的不确定性,近年来出现了一些替代品的研发和应用,以减少对胎牛血清的依赖性。未来,随着替代品的不断发展和完善,胎牛血清在细胞培养中的应用可能会逐渐减少,但目前...