HE染色法,。苏木精染液为碱 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。而线粒体用HE染色不可见,活细胞通常要求活细胞近似无色线粒体需要用健那绿来染色,再在高倍镜下观察。从人或动物新鲜尸体上取下块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%福尔马林,Bouin氏固定液等)使、细胞的蛋白质变凝固,以防止细胞后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂,逐渐脱去块中的水份。再将块置于既溶于酒精,又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明,以二甲苯替换出块的中酒精,才能浸蜡包埋。什么是HE染色,HE染色实验的目的。内蒙古靠谱的HE染色价格
HE染色伊红溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改变组织等电点,促进伊红与胞浆蛋白质结合,其本身不参与染色的反应。当苏木素染色效能极高,很短时间就导致核浆共染时,可适当地添加冰醋酸(一般不超过2%),抑制苏木素染色效能,方便控制染色时间,同时也能提高苏木素染色的清晰度。现在有商用的HE染色液卖,但是质量参差不齐。如果课题组较大,完全可以自己配制,效果也挺好。配制为乙酸浓度5%-7.5%和盐酸浓度为0.5%-1%的苏木素溶液放置一周,即可完全成熟,染色效果好,氧化膜和结晶都很少(一般苏木素中酸度越低越容易产生氧化膜和结晶,这也是提示更换苏木素的标志之一)。内蒙古靠谱的HE染色价格HE染色的基本原理和结果分析。
HE染色原理:易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia);而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
HE染色攻略:HE染色又称为苏木精-伊红染色,染色后组织或细胞可以借助普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。这种方法适用范围***,对组织细胞的各种成分都可着色,便于***观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。可以观察细胞结构、组织层次等等。首先切片组织是否完整,组织有无损伤;然后看切片有无刀痕;***细胞核是否清晰可见,胞核与包浆要对比鲜明。冰冻切片是否可以做HE染色?
HE染色常见问题:Q3:细胞核染色过浅,颜色暗淡答:切片在苏木素染液中停留过短,或苏木素过度氧化失效,或分化时间太长。对策:重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液,每个3-5min即可,接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h,自来水冲洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h,自来水冲洗10min染色。Q4:细胞核染色过深,胞浆着蓝色答:切片在苏木素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。心脏组织HE染色如何观察。内蒙古靠谱的HE染色价格
HE染色技术几种常见的染色问题。内蒙古靠谱的HE染色价格
HE染色碱染料染主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着色。学上常用的一种染色方法为苏木精 伊红染色法。苏木精 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸颗粒呈强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白液体呈粉红色。内蒙古靠谱的HE染色价格