根据gm20541的cdna序列设计引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3;gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3;(g)以提取的cdna为模板,进行rt-pcr。扩增后进行电泳。结果见图4中b,可以看出,通过rt-pcr方法检测gm20541在gm20541基因敲除纯合子小鼠的视网膜中表达量降低。图4的b中ctrl是指野生型对照,sixko是指gm20541基因敲除纯合子小鼠;gm20541rnalevel是指rna表达水平相对变化,以野生型表达水平为1。实施例3对4月龄的gm20541基因敲除纯合子小鼠进行erg视力检测:1暗适应动物应整夜暗适应,环境应做到没有光线;2次日麻醉:称重,腹腔内注射;宜深度麻醉;3动物固定及散瞳:麻醉完成后,在暗红光照明下将小鼠用胶带固定在动物试验平台的前方:需保证小鼠正"趴",即相对于闪光刺激器的刺激口,双眼高度一致,充分暴露,滴加散瞳剂。4电极安装:将视网膜电图仪(espionvisualelectrophysiologysystem,diagnosysllc,littleton,ma,usa)预热后,在耳夹电极涂上导电膏,夹尾巴,插入放大器“地”接口;双头的针电极插入后颈皮(大约在两耳中间),同时接两个通道的“负”接口;金环电极夹在动物实验平台的电极支架上,仔细调整其角度。慢性阻塞性肺疾病是一种具有气流阻塞特征的慢性和(或)肺气肿。江苏皮下成瘤动物模型构建

技术实现要素:本发明的目的在于提供利用gm20541基因构建视网膜色素变性疾病模型的方法和应用,采用该构建方法可以得到视网膜色素变性疾病模型,该模型可表现出视网膜色素变性性疾病特征,该模型可用于视网膜色素变性性疾病的研究,可以帮助阐明rp的发病过程及机制,并为该疾病的或预防提供新的靶标。本发明是这样实现的:方面,本发明实施例提供了一种利用gm20541基因构建视网膜色素变性疾病模型的方法,其包括:敲除目标动物视网膜前体细胞中的基因组中的gm20541基因。znf124是一种编码锌指蛋白的新基因。锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子,对基因调控起重要的作用。znf124蛋白可穿过核孔进入核内,作为转录因子调控其他基因的表达。目前针对znf124蛋白功能的研究报道并不多,对其功能也知之甚少,znf124与一种先天性系统发育疾病dandy-walker复合征(dandy-walkercomplex,dwc)相关。此外,znf124被认为参与了前体生长因子(vegf)对人造血细胞凋亡的抑制作用,表明znf124在人体生命活动中承担有重要功能。发明人的另一研究表明,znf124基因突变与rp有关,对探索rp的致病机制有极大帮助。因此,深入研究znf124对视网膜色素变性疾病的及病因探讨潜力巨大。湖北外包动物模型培养人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。

实验动物8周龄,24g体重的C57BL/6小鼠(二)试剂耗材1、实验试剂DSS、水2、试剂配制称取一定量的DSS,使用水溶解,配置成2%-5%(w:v)的DSS水溶液,DSS溶液配制好完成后可在4℃避光保存。3、造模动物按照体重随机分组后,将动物水瓶内的水溶液更换为DSS水溶液,按照5ml/只*天进行准备,隔两天后更换新的DSS溶液(DSS给药时为day1,在day3、day5更换DSS溶液),第8天将DSS溶液更换为不含DSS的清水。造模后持续观察动物状态,通过DAI评分判定动物成模情况。
造模方式:1、将大鼠随机分配至2组中,每组5只,正常喂食喂水7d后进行试验;2、大鼠体重为200g±10g,按组别给予药物:生理盐水组每只腹腔注射1ml生理盐水、模型组每只按5ml/kg背部皮下注射四氯化碳3、各组药物注射24h后取材进行相关检测生化结果显示:给予四氯化碳后TP含量下降,ALT和AST含量上升HE:生理盐水组肝索结构清晰,血管内无淤血,血管周围无炎症病灶,肝小叶结构清晰;给予四氯化碳后肝索排列紊乱,结构不清,存在大量坏死区域且肝索结构消失,有大小不一的空泡结构,多数血管内有淤血并伴有粉染蛋白样物质,血管周围有炎症反应灶,少量红细胞渗出;西维来司钠介入后肝索排列不清晰,存在部分坏死区域且肝索结构消失,有大小不一的空泡结构,少数血管内有淤血并伴有粉染蛋白样物质,血管周围有炎症反应灶,极少量红细胞渗出。博莱霉素是具有多种抗肿瘤作用的多组分,其毒副作用之一是引起肺纤维化。

进而使一些生长因子受体磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周龄雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮肤。在DMBA涂抹一周后,每周两次将TPA(40nmol)施用到相同部位。模型验证:几周后,小鼠背部皮肤上出现色素沉着斑点。组织学研究表明,小鼠真皮组织中色素细胞积累,某些色素细胞表现出嵌套的形态学模式。缺点:化学诱导黑素瘤小鼠模型缺乏与人类疾病的临床相关性。另外,此类模型可用于研究阳光对黑色素细胞痔转化为侵袭性的黑色素瘤的过程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系统功能,因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前应用多的模型。应用:移植接种的黑色素瘤小鼠模型概括了黑色素瘤原位发展、转移的一些特点,多用于抗和转移药物评估。1同种移植模型同种移植模型是将小鼠黑素瘤细胞接种到具有相同遗传背景的小鼠中获得小鼠黑素瘤模型。此模型包括ICR小鼠的Harding-Passey黑色素瘤模型、DBA小鼠的S91黑色素瘤模型、C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤模型,其中C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤是常用模型。优点:同种移植模型具有免疫能力,可通过黑色素细胞与免疫细胞之间固有的相互作用来研究黑色素瘤与微环境的关系。急性肺损伤(acute lung injury,ALI)。江苏大鼠动物模型造模
卵巢切除致骨质疏松大鼠模型。江苏皮下成瘤动物模型构建
中风模型)股动脉内皮损伤模型颈动脉结扎或部分结扎术深静脉血栓模型下肢缺血模型门腔静脉分流术左、右心血流动力学测试左心系统测压右心系统测压腹部手术胆管结扎术胃大部切除术小肠部分切除术急性肾衰模型单侧肾切除术3/4肾切除术5/6肾切除术脾切除术肾上腺切除术肾上腺髓质摘除术骨关节炎模型脾神经切除术肝脏迷走神经切断术胃迷走神经切断术膈下迷走神经切断术去势术输精管结扎术卵巢切除术单侧或双侧输卵管结扎术子宫切除术输尿管结扎术神经系统手术单侧脑内定位插管双侧脑内定位插管侧脑室导管侧脑室微量渗透泵导管第3脑室插管腓肠肌神经切除术软组织手术甲状腺切除术甲状旁腺切除术甲状腺切除术伴甲状旁腺再植入术胸腺切除术松果体切除术垂体切除术传感器植入手术血压遥测左心室压遥测门静脉压遥测血压与心电图遥测血压与脑电图遥测胸内压遥测胸内压与心电图遥测心电图遥测脑电图遥测肌电遥测心电图与脑电图遥测脑电图与肌电遥测血糖遥测体温与活动度遥测血管导管手术颈动脉导管颅内给药颈动脉导管腹主动脉导管股动脉导管股静脉导管单侧颈静脉导管双侧颈静脉导管门静脉导管下腔静脉导管非血管导管手术胆管导管胃导管十二指肠导管空肠导管回肠导管盲肠导管结肠导管膀。江苏皮下成瘤动物模型构建