通常应等锅内水烧开后排气3~5min，待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。另一种排除冷空气的方法是：按上述方法盖紧锅盖，加热使锅内产生蒸汽。当压力表指针达到33.78kPa时，打开排气阀，将冷空气排出，此时压力表指针下降。当指针下降至零时，冷空气排尽，关上排气阀。当锅内压力上升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。5.达到灭菌所需时间后，切断电源或关闭煤气。让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力下降到0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开锅盖，10min后取出灭菌物品。千万要注意，如果压力未降到0就打开排气阀，会因锅内压力突然下降，使容器内的液体由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染 [2]。加热水：将水加热至沸腾，产生蒸汽。浦东新区应用蒸汽压力灭菌器特点
6. 开盖操作达到灭菌时间后即可切断电源，在压力降到0.05MPa，可缓慢放出蒸气，注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢。当压力降到零后才能开盖，取出培养基摆在平台上以待冷凝，不可久不放气，否则容易引起培养基成分变化以至无法制作斜面培养基。如果因为久不放气导致锅炉内产生负压、盖子打不开，可以将放气阀打开，让空气进入，内外压力平衡后盖子就可以打开了。7. 灭菌后操作要求消毒物品干燥后检查指示剂，当达到灭菌要求时可出锅。取无菌物品时，要严格无菌操作，开盖物品先将盖盖好，贮槽关闭好通气孔。同时应分类放置，顺序发放取用。虹口区质量蒸汽压力灭菌器结构当锅内压力上升到所需压力时，控制热源维持压力至所需时间。
8. 防止超热蒸汽。超热蒸汽温度虽高，但像空气一样，遇到消毒物品时不能凝成水，不能释放潜热，所以对灭菌不利。防止超热的办法是使用外源蒸汽灭菌器时，不要使夹层的温度高于消毒室的温度，两者应相近不要使压力过高的蒸汽进入消毒室内；灭菌时不要先用压力高的蒸汽加热到要求温度，然后再降至正常压力。9. 高压灭菌后不变质的物品如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间。
四、排尽空气。使用高压蒸汽消毒锅时， **关键的是将锅内空气排尽。如锅内有空气，则气压针所指的压强不是饱和蒸汽产生的压强。相同的压强， 混有空气的蒸汽其温度低于饱和蒸汽所产生的温度。五、合理计算灭菌时间。灭菌时间包括：①穿透时间，从锅内达到灭菌温度开始计算时间，到锅内**难达到的部位也达到此温度的时间；②维持时间，即杀灭微生物所需时间， 一般以杀灭嗜热脂肪杆菌芽胞所需时间来表示；③安全时间，为使灭菌得到确切保证所需增加的时间。加热水源：通过加热水产生蒸汽。
高压灭菌器（Autoclave），又称高压灭菌锅，是一种利用高压饱和蒸汽对医疗器械、培养基等物品进行灭菌的生物学科仪器，由Charles Chamberland于1879年发明。主要应用于医疗卫生、科研、农业及制药等领域，其灭菌原理是通过加压使水的沸点升至100℃以上（通常为121℃、压力0.1MPa），并在15-30分钟内通过高温蒸汽杀灭微生物 [2]。该设备由密封桶体、压力表、安全阀等部件构成，配备电动锁系统、双向安全联锁装置及智能控制模块，具备超压保护、低水位报警等安全机制。按样式分为手提式（18-30L）、立式（30-200L）及卧式等类型，支持脉冲排汽、预置程序等扩展功能。操作时需确保灭菌物品合理装载、排尽空气，灭菌结束后待压力归零且温度降至安全范围方可开盖，并定期维护密封圈、压力表等部件 [1-2]。医疗行业：用于灭菌手术器械、注射器等。浦东新区挑选蒸汽压力灭菌器结构
密封圈切勿附油，以免损坏胶质而造成漏气。浦东新区应用蒸汽压力灭菌器特点
灭菌物品均须适当包装，以防取出后污染。物品包装不宜过大，每件不宜超过30cm×30cm×50cm，各包件之间留有空隙，以利于蒸汽流通。瓶、罐、器皿应去盖后侧放。灭菌开始时，先关闭器门，使蒸汽进入夹套，在达到所需的控制压力后，旋开冷凝阀少许，使冷凝水和空气从灭菌室内排出。再开放总阀，使蒸汽进入灭菌室。在灭菌室温度表达到所需温度时开始计算灭菌时间，不同物品灭菌所需时间见下表。到达灭菌所需时间后，应即熄火或关切进气阀，逐渐开放排气阀，缓缓放出蒸汽，使室内压力下降至0。灭菌物品为敷料包、器械、金属用具等，可采用快速排气法。如灭菌物品是瓶装药液，不宜减压过快，以免药液沸腾或喷出瓶外。将门打开，再等10～15分钟后取出已灭菌的物品，利用余热和蒸发作用来烤干物品包裹。浦东新区应用蒸汽压力灭菌器特点
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