通常应等锅内水烧开后排气3~5min，待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。另一种排除冷空气的方法是：按上述方法盖紧锅盖，加热使锅内产生蒸汽。当压力表指针达到33.78kPa时，打开排气阀，将冷空气排出，此时压力表指针下降。当指针下降至零时，冷空气排尽，关上排气阀。当锅内压力上升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。5.达到灭菌所需时间后，切断电源或关闭煤气。让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力下降到0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开锅盖，10min后取出灭菌物品。千万要注意，如果压力未降到0就打开排气阀，会因锅内压力突然下降，使容器内的液体由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染 [2]。选择适合蒸汽灭菌的包装材料，以确保蒸汽能够有效渗透。虹口区应用蒸汽压力灭菌器结构
高压蒸汽灭菌，用高温加高压灭菌，不*可杀死一般的细菌、***等微生物，对芽孢、孢子也有杀灭效果，是**可靠、应用**普遍的物理灭菌法。主要用于能耐高温的物品，如培养基、金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶及一些药物的灭菌。高压蒸气灭菌器的类型和样式较多，如：①下排气式压力蒸气灭菌器是普遍应用的灭菌设备，压力升至103.4kPa（1.05kg/cm2），温度达121.3°C，维持15~30分钟，可达到灭菌目的。②脉动真空压力蒸气灭菌器已成为**的灭菌设备。灭菌条件要求：蒸气压力205.8kPa（2.1kg/cm2），温度达132℃以上并维持10分钟，即可杀死包括具有顽强抵抗力的芽孢、孢子在内的一切微生物。杨浦区标准蒸汽压力灭菌器特点安全阀、排气阀出厂时已校定位置，阀上的铅封及螺丝不得任意拆启。
。灭菌时将指示管放入物品内，灭菌完毕取出指示管，如其中化学物质已经熔化，说明灭菌室内的温度达到了指示管所指示的温度。常用化学物质的熔点为：安息香酸酚，110℃；安替比林，111～113℃；乙酰苯胺，113～115℃；琥珀酸酐，118～120℃；苯甲酸，121～123℃；芪（二苯乙烯），124℃；硫黄粉的熔点为121℃，但国内多数医院所用的硫黄熔点为114～116℃，比较低者*111.2℃，可见硫黄熔点法判断高压灭菌的效果是不可靠的。1982年上海市卫生防疫站研制了一种变色管，在2%琼脂内加入1% NTC（新三氮四氯），趁热吸取1ml左右置入耐高压小玻璃管内，封口备用。使用时将其放入物品**难达到灭菌的部位。当灭菌室内压力达到6.8kg（15 lb），温度达到（120±1）℃并维持15分钟后，指示管内无色琼脂变为紫蓝色物质。若灭菌温度和时间未达到要求，则不会变色。 [2]
3.氧化剂氯化钾，氯化钠，氯化铵和其他氯化物。（粉剂）高氯酸钾，高氯酸钠，高氯酸铵和其他高氯化物。硝酸钾，硝酸钠，硝酸铵和其他硝酸物。过氧化钾，过氧化钠，过氧化钡和其他无机过氧化物。亚氯酸钠和其他亚氯化物，次氯酸钙和其他次氯酸物。4.易燃物质二，醚，汽油，乙醛（醋醛），氧化丙稀，环氧丙烷，二硫化碳和其他燃点在-30℃～0℃间的物质。甲醇，乙醇，二甲苯，苄基，乙酸苄酯，和其他燃点在0℃～30℃之间的物质（醇类）。灯油，火油，汽油，异戊醇，乙酸（醋酸），和其他燃点在30℃～65℃之间的类似物质。压力灭菌器是确保无菌环境的重要设备，对于防止保证实验结果的可靠性至关重要。
6. 开盖操作达到灭菌时间后即可切断电源，在压力降到0.05MPa，可缓慢放出蒸气，注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢。当压力降到零后才能开盖，取出培养基摆在平台上以待冷凝，不可久不放气，否则容易引起培养基成分变化以至无法制作斜面培养基。如果因为久不放气导致锅炉内产生负压、盖子打不开，可以将放气阀打开，让空气进入，内外压力平衡后盖子就可以打开了。7. 灭菌后操作要求消毒物品干燥后检查指示剂，当达到灭菌要求时可出锅。取无菌物品时，要严格无菌操作，开盖物品先将盖盖好，贮槽关闭好通气孔。同时应分类放置，顺序发放取用。立式蒸汽压力灭菌器：包括半自动式和全自动式，广泛应用于医院、疾控中心等机构。浦东新区质量蒸汽压力灭菌器报价
达到灭菌所需时间后，切断电源或关闭煤气。虹口区应用蒸汽压力灭菌器结构
九、不能使用高压蒸汽灭菌器消毒任何有破坏性材料和含碱金属成份的物质。消毒这些物品将会导致或腐蚀内胆和内部管道，以及破坏垫圈。危险物品清单：1.物质乙二醇二硝酸酯（***醇），硝酸甘油，硝化纤维素（硝化纤维素滤器）和所有含硝酸根的酯类。三硝基苯，**和所有易燃易爆的硝基,过氧乙酸，甲烷基，乙基，甲醇，过氧化氢，过氧化物，苯甲酰，苯甲酰基及有机过氧化物。2.可燃性物质金属锂、钾、钠、黄磷、磷、硫化物、红磷。明胶、碳化钙（电石）、氧化钙（石灰），镁粉，连二亚硫酸钠（保险粉）。虹口区应用蒸汽压力灭菌器结构
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