糖原染色 用于鉴别淋巴系统细胞增生的性质鉴别红细胞系统增生的性质[英文缩写]PAS[参考值]正常人淋巴细胞PAS反应积分正常人幼红细胞PAS反应积分[临床意义]恶性淋巴瘤、急慢性淋巴细胞白血病时PAS积分升高巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再障贫血时幼红细胞PAS反应多为阴性红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征时幼红细胞PAS反应积分可40甚至高达100--200以上用于不典型巨核细胞与李-斯细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性后者为阴性或弱阳性;用于高雪细胞和尼曼一匹克细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性而后者反应为阴性或弱性细胞核、染色体以及基因表达的研究。江苏哪家生产糖原染色试剂盒哪家便宜
糖原染色法:染色原理细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基,其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色,沉积在细胞内多糖所在之处。染色步骤:1.组织石蜡包埋切片后脱蜡至水,蒸馏水洗2min(细胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加过碘酸溶液,氧化5min;3.蒸馏水洗10min;4.滴加Schiff试剂,侵染10-20min;5.倾去Schiff试剂,流水冲洗10min;6.滴加苏木素染色液,染核1-2min;7.流水冲洗5min;8.酸性乙醇分化液分化。江苏哪家生产糖原染色试剂盒直销价操作简单方便,1h内即可完成反应。
PAS染色试剂配制及染色方法:1.材料与方1.1 实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例,均来自我室实验材料。1.2 主要试剂1.2.1 AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液,其配方:无水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3 过碘酸溶液 0.5g过碘酸(HIO)溶于100mL蒸馏水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:过碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸钠0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 无色品红液(Schiff氏液) 在三角烧内加入蒸馏水500mL,煮沸后,在保持微沸的情况下,加入碱性品红2.5g,并不断摇动约5min(勿使之沸腾),使碱性品红彻底溶解(溶解液为深红色)。冷却到50℃时,过滤,加入1N盐酸50mL,再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g,塞住瓶口,摇动容器以充分混合(此时颜色明显变淡),然后避光放置或冰箱内24h
粘液染色法:粘液一般有以下几点特性:(1)对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。(2)对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。(3)遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。(4)溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种:1、P.A.S染色法:操作方法同前,结果;中性粘液性物质,某些酸性粘液物质呈红色,核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法:该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法:(1)切片常规脱蜡入水。(2)3%醋酸液洗2分钟,入1%阿利新兰醋酸液(PH2.5)10-20分钟。(3)蒸馏水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)苏木素淡染2-3分钟,水洗。(6)常规脱水、封片可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能较好地保存糖原,但有使糖原流动到细胞一侧的现象,多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存,是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此较好不单独使用乙醇固定,以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。山东正规糖原染色试剂盒报价
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注意事项:染色时:①染色时必须严格按照染色操作说明书进行染色。②在染色过程中,前一个染液浸染完成后,在进行下一个染液的步骤之前,必须彻底充分水洗,使前一个染液冲洗干净后再进行下一步骤。③每次滴加染液前,务必吸干组织上多余的水分,避免多余的水把染液稀释了,造成染色不佳。④在滴加染液时,务必使染液完全覆盖组织,但不能溢出圈外,避免浪费试剂。在染色时,用有色铅笔在组织周围划一个圈,这样在滴加染液时就不会使染液溢出。江苏哪家生产糖原染色试剂盒哪家便宜
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。3、自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。4、入过碘酸溶液,室温放置,一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室温阴暗处浸染。7、自来水冲洗10min。8、入苏木素染色液,染细胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗,使其返蓝。11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶...