鼠尾胶原是一种天然培养基和一种天然的黏附剂,可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养;也可用于制备三维胶原凝胶,使细胞在模拟的三维环境中生长。制备鼠尾胶原方法:1、取大鼠尾巴洗净,75%酒精浸泡5分钟;2、手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的较高,折断尾骨后拉出尾腱;3、将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡;4、重复步骤2、3,直至尾腱量够用;5、吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克);6、将尾腱置于平皿内剪碎,转移至三角烧瓶中;7、按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液;8、摇晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期;9、离心,4000转/分,10-15分钟;10、吸取上清,分装成小瓶,4℃保存。鼠尾胶原醋酸溶解:将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中。重庆正规鼠尾胶原厂家推荐
一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法:1.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,调节pH = 6.5,用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中,不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出,4°C沉淀10小时,去除上清液,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀; 2.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,调节PH = 6.5 ;溶液依次通过阳离子交换树脂、阴离子交换树脂进行脱盐处理; (8)将脱盐后的胶原蛋白溶液,-40至-20°C预冻2〜4小时,然后真空冷冻干燥,冻干产品经进一步处理得到含水率在3%以下的胶原蛋白微粉,灭菌、包装,得到成品胶原蛋白粉末。重庆正规鼠尾胶原厂家推荐建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。
服用胶原蛋白的注意事项:1、大分子胶原蛋白进入人体后需要降解为小分子肽、氨基酸才能被人体吸收,真正有效吸收的成分并不多。2、这些食物多半脂肪含量较高,不适合经常食用。高热量、高脂肪,尤其是油炸食物都容易产生自由基,加速老化。如果能少吃这一类食物,就等于减少了身体被自由基伤害的机会及皮肤出现黑斑、皱纹等的风险。3、孕妇是不能服用胶原蛋白产品,因胶原蛋白是19种氨基酸组成的,其中有几种是不能被胎儿吸收的,容易引起第二特征过早的发育和成熟,不利于出生后的婴儿成长和发育。
鼠尾胶原,10mg包装,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超纯水至100ml,容量瓶配制比较准确。2.用吸管吸取10ml刚配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z准确),加入盛胶原的瓶中,轻轻颠倒,不要震荡,蛋白 容易起泡。几分钟即可,蛋白质非常好溶解。3.将胶原溶液移入事先压好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大点的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一档就行,避免加入气泡。然后4度过夜除菌。4.第二天将上层胶原溶液分装进EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷冻。冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至目。
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等 步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞 培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境, 使细胞在三维环境中生长。 1,在使用鼠胶原蛋白 型包被的细胞培养皿中检查到PC-12 细胞的 贴壁和生长。 1mg/ml浓度以上,pH 左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到 NIH-3T3 细胞在三维胶内正常生长、PC-12 细胞在三维胶表面 正常生长。 使用方法: 1、细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度: 1-5ug/cm 0.012mg/ml。按以下表格体积加到相应的培养器皿中。制备鼠尾胶原:取大鼠尾巴洗净,75%酒精浸泡5分钟。重庆正规鼠尾胶原厂家推荐
I型胶原蛋白(Collagen, Type I)结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体。重庆正规鼠尾胶原厂家推荐
胶原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低离子浓度酸性条件浸渍处理原料,从而破坏分子间的盐键和希夫碱,而引起纤维膨胀、溶解。作为溶剂使用的酸,主要有盐酸或亚硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、柠檬酸和甲酸等。酸法是提取胶原蛋白比较常用和有效的方法,用酸法提取的胶原较大程度地保持了其三股螺旋结构。此法处理快速,所得产品的分子量是连续的,适用于医用生物材料及原料的制备,但产品得率低,设备腐蚀严重,污染重。赵苍碧等[2]采用0.3 %的醋酸溶液在4 ℃下从牛腱中提取胶原蛋白,得到高纯度的胶原蛋白溶液。重庆正规鼠尾胶原厂家推荐
鼠尾胶原的生物矿化和TEM观察:果冻样Ⅰ型胶原蛋白胶体初始浸泡在矿化液中时呈微白色;矿化2d后,胶体的颜色逐渐加深至乳白色;矿化6d后,随着羟基磷灰石晶体矿化长入胶原纤维内部,胶体颜色加深至纯白色,并在胶体表面沉积了一层薄薄的羟基磷灰石钙晶体,予镊子夹起,其表层羟基磷灰石钙晶体破碎散落。TEM表征显示:矿化2d后,Ⅰ型胶原纤维的明暗相隔周期性条纹结构逐渐模糊,羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维内部,胶原纤维部分矿化,沿着胶原纤维生长,忖度变深;矿化6d后,Ⅰ型胶原纤维的明暗相隔D-Band结构完全消失,胶原纤维内部可以看到黑色羟基磷灰石晶体,嵌入胶原纤维纵向生长。当鼠尾Ⅰ型胶原纤维完全矿化时,由于整...