外泌体研究的主要应用:外泌体的功能取决于其所来源的细胞类型,其可参与到机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、一些病症侵袭等方方面面。有研究表明一些病症来源的外泌体参与到一些病症细胞与基底细胞的遗传信息的交换,从而导致大量新生血管的生成,促进了一些病症的生长与侵袭。一些病症。一些病症转移。来自白血病干细胞的外泌体促进急性骨髓性白血病(AML)细胞的增殖、迁移和压制细胞凋亡。治病靶标。利用外泌体递送小干扰RNA来沉默KRASG12D,从而特异性高效靶向至胰腺病细胞,以明显降低RAS活化、病细胞增殖和转移过程。免疫。β细胞将含有蛋白质和miRNA的外泌体释放到细胞外,并可转移到其他代谢部位或免疫内皮细胞,有利于维持葡萄糖体内平衡或造成胰岛素抵抗。心血管。外泌体介导miR-155从平滑肌细胞转移到内皮细胞导致了内皮细胞的损伤促进动脉硬化。分子标记。疾病诊断。在酒精性肝病、NASH、菌类性肝炎、药物性肝损伤和肝细胞病中发现循环EVs的水平上升。预后标志。外泌体提取:通过色谱分离的外泌体不受剪切力的影响,这可能会改变囊泡的结构。昆明正规外泌体提取试剂哪家便宜
在这项新的研究中,经过基因修饰的外泌体(被称作iExosome)能够运送特异性地靶向KRAS突变基因的小RNA分子,从而导致胰腺病模式小鼠病情缓解,增加它们的总存活率。这些研究人员采用了一种被称作RNA干扰(RNAi)的靶向方法:利用这些天然的纳米颗粒(即外泌体)运送小干扰RNA(siRNA)或短发夹RNA(shRNA)分子来靶向胰腺病细胞中的KRAS突变基因,从而影响多种胰腺病模型的一些病症负荷和存活。他们证实外泌体能够作为一种高效的RNAi载体发挥作用,这是因为这些纳米大小的囊泡(即外泌体)轻松地在体内迁移和进入靶细胞(包括病细胞)中。宁波正规外泌体提取试剂服务电话外泌体是一种能被机体内大多数细胞分泌的直径大约为30~150nm的具有脂质双层膜的微小膜泡。
人体几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体,外泌体普遍存在并分布于各种体液中,携带多种蛋白质、mRNA、miRNA和脂质类物质等,作为重要的传递信号分子,形成了一种全新的细胞-细胞间信息传递系统,可参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和一些病症细胞生长等过程。外泌体与微泡:我们知道,细胞间相互作用可以通过释放蛋白质、核酸、脂质等分子到胞外与受体结合从而介导胞内细胞传导。除此之外,细胞还可以释放膜囊泡,外泌体与微泡就是其中两种,二者相似但形成方式不同:外泌体是细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中的膜囊泡,而微泡则是细胞出芽与细胞膜融合后直接脱落形成的囊泡,且外泌体大小均一,直径在40~100nm,其大小取决于其起源部位以及细胞中的脂质双层结构;而微泡大小不一,直径在50~1000nm之间。唐山正规外泌体提取试剂产品介绍在超速离心力作用下,使蔗糖溶液形成从低到高连续分布的密度阶层,是一种区带分离法。
外泌体的提取、分离方法:尺寸排阻色谱法和超滤法;尺寸排阻色谱法是利用分子筛理论,较初是根据蛋白质分子大小分离蛋白质的色谱技术。该方法的主要优点是不需要很大的离心力,从而保证了外泌体的完整性。Mol等[13]对比超高速离心和尺寸排阻色谱法得到的外泌体蛋白,结果显示,后者得到的外泌体的蛋白丰度高于前者。这些基于过滤或尺寸排阻色谱的新方法为外泌体大规模的生产和临床应用提供了可能。超滤也是根据外泌体的尺寸将其分离出来的一种方法,超滤一般被认为是外泌体分离过程中的一个准备过程,通过超滤除去大分子和小分子的蛋白质。不过连续的超滤可以分离出外泌体,和超高速离心相比,超滤不需要特殊的设备就可以较短时间内分离出外泌体。但是,超滤膜对外泌体的黏附作用会降低外泌体的产量,并且超滤过程中施加的外力可能会使外泌体变形或者破裂。外泌体的提取分离:超滤离心。
外泌体的提取、分离方法:超高速离心法。常用的是超高速离心法,该方法是被誉为分离外泌体的“金标准”。该方法利用离心力从细胞培养液或生物流体获得外泌体,经过400×g、2000×g、10000×g的低速离心,除去细胞及大的细胞分泌物;较后超高速100000×g离心得到外泌体[12]。超高速离心因操作简单,不需要复杂的技术支持,并且成本相对较低而被普遍使用。但是该方法耗时、产率低,得到的外泌体的数量和质量很大程度上受转子的类型、转子沉降角度等因素影响,其中较主要的问题就是差速离心法获得的沉淀物是外泌体,但也会有其他的囊泡、蛋白质或蛋白和RNA的聚集体。外泌体的提取分离:PEG-base沉淀法。深圳正规外泌体提取试剂服务电话
外泌体提取:根据外泌体的大小,从蛋白质和其他大分子中分离外泌体。昆明正规外泌体提取试剂哪家便宜
外泌体的提取、分离方法:聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分离病毒和其他的生物大分子已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,较常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。昆明正规外泌体提取试剂哪家便宜
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1996年GRaposo等发现类似于B淋巴细胞的免疫细胞也会分泌抗原呈递外泌体(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗一些病症反应。2007年HValadi等进一步发现细胞之间可以通过外泌体中RNA交换遗传物质。随着有关外泌体研究越来越多,研究者发现它普遍参与了机体免疫应答、抗原呈递、细胞分化、一些病症生长于侵袭等各种生物过程中。目前的主流观点认为,外泌体的产生过程为:细胞膜内陷,形成内体(endosome),再形成多泡体(multivesicularbodies,MVB),较后分泌到胞外成为外泌体。外泌体中携带有母细胞的多种蛋白质、...