糖原染色(过碘酸-雪夫反应) 原理 多糖中乙二醇基 经过碘酸氧化成二醛基与无色品红结合, 形成紫红色化合物。沉积于含糖原的胞浆中。结果:胞浆中出现弥散状,颗粒状,块状红色为阳性。 无红色颗粒为阴性 _x000c_临床意义 1、正常血细胞的染色反应 粒系:原粒细胞糖原含量很低,随着细胞的分化成熟,糖原含 量逐增加,至成熟阶段糖原含量十分丰富。 淋巴细胞:糖原常凝聚成颗粒或块状。巨核细胞-血小板系统:PAS反应呈粗大的紫色颗粒或团块。 正常红系:阴性。对疾病诊断的意义白血病类型的鉴别: 急性粒细胞白血病:原始粒细胞呈阴性或弱阳性反应,以弥 散性为主; 急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞多呈粗颗粒、块状阳性反应。故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。北京咨询糖原染色试剂盒直销价
糖原染色(PAS):(1)原理:过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合,形成紫色化合物,定位于细胞质中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分钟,流水冲洗,晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟,流水冲洗,晾干。滴加雪夫液作用60分钟,流水冲洗,晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟,流水冲洗,晾干镜检。(4)临床意义:根据染色阳性程度和阳性物形态鉴别主要用于急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病鉴别,还有助于红白血病与巨幼细胞贫血和溶血性贫血的鉴别诊断。北京提供糖原染色试剂盒取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。
特殊染色化学试剂的选择:化学试剂的选择主要针对自配试剂而言,对于商品化试剂盒则在于染液质量。1、一般要求选用很好品牌的化学试剂,特别是一些染色中关键的试剂。很好的化学试剂(如Sigma、国药、阿拉丁、西陇等)是保证高质量染液的前提和关键,特别对于染液中的关键试剂尤为重要。如碱性品红在一些染色液(抗酸、无色品红、醛品红等)中均为主要试剂,其质量决定了较终的染色效果。如配制无色品红染液时,所使用的偏重亚硫酸钠试剂质量不合格,则会导致染液配制失败,无法染出合格的切片。2、纯度一般以分析纯为主。
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:PAS染色时需于暗处加盖反应,染色时间10~20min(染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度,SO浓度高,染色时间适当缩短;环境温度高,染色时间也应适当缩短,反之则需适当延长反应时间)。染色过程中不能接触伊红,以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时,较好作消化对照,即取两张连续切片,其中一张脱蜡至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如经消化处理的切片染色阴性,不经消化处理的切片染色阳性,即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠(钾)溶液配置后,不能保存,因此,必须现配现用,用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以18~22℃佳。
染色的原理和临床意义:在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理,同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间,较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞,因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒-单核细胞白血病 该染色法在急性粒-单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞,甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应,因此酯酶双染色反应在急性粒-单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。湖南品质好的糖原染色试剂盒服务电话
推荐用于骨和软骨的染色。北京咨询糖原染色试剂盒直销价
弹力染色应用:(1)动静脉的辨认:在血管病变时是动脉还是静脉以及是否为血管壁难辨认时,弹力纤维染色有助于辨认。有弹力板者为动脉,有弹力纤维构成血管轮廓者为血管。弹力纤维抗损伤能力较强,故弹力性纤维构成血管轮廓不易损坏。(2)弹力纤维瘤的诊断:弹力纤维染色可见瘤样病变内有大量弹力纤维增生,非真性。(3)心血管先天性弹力组织增生,这组疾病有先天性内膜炎及冠状动脉的弹力纤维组织增生。弹力纤维染色有助于诊断。(4)弹力纤维损伤性疾病:这组疾病有肺气肿、、大动脉中层炎症等,弹力纤维染色有助于这些疾病的观察诊断。北京咨询糖原染色试剂盒直销价
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。3、自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。4、入过碘酸溶液,室温放置,一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室温阴暗处浸染。7、自来水冲洗10min。8、入苏木素染色液,染细胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗,使其返蓝。11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶...