湖南如何使用糖原染色试剂盒推荐厂家

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色试剂盒不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化，这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解，形成水溶性的双糖-麦芽糖，在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段，但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑，不主张应用唾液。应该尽可能割取生活着的组织块，并随即投入固定液。湖南如何使用糖原染色试剂盒推荐厂家

染色的一般原则：1.荧光素产品一般为微量试剂，取用前请离心集液，以及避光保存和使用。建议您在收到产品之后，分装为小份避光保存于-20℃，即用即取。2.式细胞仪只可检测单细胞悬液，如使用组织样本，首先必须制备成单细胞悬液，细胞数量不应低于1X106/ml。3.推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。福建正规糖原染色试剂盒哪里买动物材料取用时需对动物施以麻醉，常用的麻醉剂有氯仿和。

染色的一般原则：因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照，进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素 FITC，EGFP激发光：488nm发射光：525nm;使用面较广，价格便宜。PE激发光488nm 发射光575nm，此荧光的激发效率较佳，故此荧光得到的信号较强；检测某些弱表达的抗原，推荐使用此荧光素。价格较FITC昂贵。APC激发光633nm， 发射光660nm，在配有双激光的流式细胞仪上，此荧光染料可与7-AAD或PI共同使用来避开自带绿色荧光的样本。流式细胞仪相关试剂盒。

糖类染色：糖类从组织化学技术角度来分，可分为多糖、中性粘液物质、酸性粘液物质、粘蛋白及粘脂质。多糖主要指糖原，它是一种胶样液态存在于肝细胞、骨骼肌、心肌等处。因糖原在肝脏及心肌疾患及某些的病变中分布和量都有一定改变，故糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义。（1）肝及心肌糖原沉着症的诊断：糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。（2）糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。（3）高雪氏病与尼曼——匹克氏病的鉴别：前者为阳性、后者为阴性，做此染色较易鉴别。（4）骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断：此瘤 80%细胞内有较多糖原，糖原染色为阳性，所以糖原染色为阳性（大多数细胞）可以协助诊断。（5）腺泡状软组织肉瘤与化感瘤：前者棒状小体糖原染色为阳性。可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。

GUS染色步骤：1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保温1小时至过夜。 2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次，至阴性对照材料呈白色。 3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。正规糖原染色试剂盒推荐厂家

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。湖南如何使用糖原染色试剂盒推荐厂家

特殊染色化学试剂的选择：化学试剂的选择主要针对自配试剂而言，对于商品化试剂盒则在于染液质量。1、一般要求选用很好品牌的化学试剂，特别是一些染色中关键的试剂。很好的化学试剂（如Sigma、国药、阿拉丁、西陇等）是保证高质量染液的前提和关键，特别对于染液中的关键试剂尤为重要。如碱性品红在一些染色液（抗酸、无色品红、醛品红等）中均为主要试剂，其质量决定了较终的染色效果。如配制无色品红染液时，所使用的偏重亚硫酸钠试剂质量不合格，则会导致染液配制失败，无法染出合格的切片。2、纯度一般以分析纯为主。湖南如何使用糖原染色试剂盒推荐厂家

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