RNA提取试剂

mRNA作为一种编码RNA，mRNA在人体内在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成。人们对mRNA的应用主要在疾病医治和疾病发现上。目前基于mRNA的医治是生命科学研究中的一颗耀眼明星，简单来讲mRNA医治就是利用化学修饰后的信使RNA分子进入细胞质中利用细胞质内的自有核苷酸进行转录表达，生成机体所需要的蛋白质。目前在研发的针对**病菌的疫苗中，很多都是mRNA疫苗。mRNA 疫苗就是以病原体的抗原蛋白对应的 mRNA 结构为基础，通过不同的递送方式递送至人体 细胞内，经翻译后能刺激细胞产生抗原蛋白、引发机体特异性免疫反应的疫苗产品。可用Nature Reviews Drug Discovery 中的这幅图了解基于 mRNA 医治的原理。口罩爱带不带，做实验时高冷一点，不要指点江山，唾沫横飞即可。RNA提取试剂

RNA提取注意事项：使用时一定要根据自己的实验需要购买**提取试剂盒， 如果不是**试剂盒，或许能提出RNA，但不能确保其质量以及完整性，会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析、分子克隆等后续实验的结果。当前提取效果好的是RNA提取试剂盒，但其售价较高，单次实验费用花费太大，对精度要求不高的实验没有必要购买，当然还有其它的进口试剂盒，但是均存在价格高、订货周期长的问题（如果碰上国内无货的时候，要从国外发货，会等很长一段时间）。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以，价格不高，基本上各地均有现货（国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种）等，其价格比进口试剂盒要便宜许多，且效果还不错，性价比还可以。唐山RNA提取试剂销售厂家即用型RNA，可在绝大多数下游应用。

RNA可分为：mRNA：在蛋白分子合成过程中，作为“信使”分子，将基因组DNA的遗传信息（即碱基排列顺序）传递至核糖体，使核糖体能够以其碱基排列顺序掺入互补配对的tRNA分子，进而合成正确的肽链，实现遗传信息向蛋白质分子的转化。tRNA：把氨基酸搬运到核糖体上，tRNA能根据mRNA的遗传密码，依次准确地将它携带的氨基酸，掺入正在合成的肽链中，实现肽链的延伸。与正在进行翻译的mRNA结合，而后rRNA将各个氨基酸残基通过肽键连接成肽链进而构成蛋白质分子。rRNA：一般与核糖体蛋白质结合在一起，形成核糖体。

细胞RNA提取的方法：异丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以见到侧壁沉淀，轻轻吸弃上清。向EP管中加入75%酒精洗涤沉淀，帮助分离剩余的有机试剂（剩余有机试剂过多会影响OD值和PCR反应），轻弹沉淀，使其浮在酒精，静置1-2min，让酒精充分接触沉淀，充分溶解有机试剂，然后4度离心5min。轻轻吸弃上清。将EP管再次放于离心机中瞬时离心，弃掉管壁残余液体。然后将EP管置于超净台中干燥5-10min.。注意RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。加入50ul DEPC处理水，震荡充分溶解沉淀。测量RNA浓度。将RNA保存于-80度。纯的RNA用RE缓冲液洗脱，不用酚提取或醇沉淀。

安德鲁·法尔称：“克雷格和我的工作是研究为什么一些基因会停止运行，我们试图去控制它们，我们发现了一些东西可以有效地中止它们。这些基因并不能告诉你它们能做什么，所以如果你能中止它们，你就可以开始了解它们能做什么。不过，较初发现RNA现象的是一位华人学者，非常可惜，他没有进一步弄清这是为什么。” 二人发现的是一个有关控制基因信息流程的关键机制。人们的基因组通过从细胞核里的DNA向蛋白质的合成机制发出生产蛋白质的指令，这些指令通过mRNA传送。他们发现一种可以用特定基因降解mRNA的方式，在这种RNA干扰现象中，双链RNA以一种非常明确的方式压制了基因表达。这项技术被用于全球的实验室来确定在各种病症中哪种基因起到了重要作用。RNase主要来自样品的细胞。RNA提取试剂

加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA提取试剂

RNA试剂盒：用于各种植物、动物、微生物的RNA提取，在每个试剂盒里都有一份说明使用说明书。实验者只需要按照说明书上的步骤操作即可。使用时无需配制其它试剂，非常方便，适合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、纯度高，可用于分子生物学后实验。但较好的试剂盒价格比较贵，在实验室可以根据自己的实验需要来定夺试剂盒的使用。注意事项所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA不纯，需电泳检测。RNA提取试剂

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