糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段,但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑,不主张应用唾液。在滴加染液时,务必使染液完全覆盖组织,但不能溢出圈外,避免浪费试剂。上海哪家生产糖原染色试剂盒推荐厂家
染色试剂盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因 (β-glucuronidase),是从大肠杆菌K- 12 菌株分离出的一种酸性水解酶。该基因产物为β-葡萄糖苷酸酶,属水解酶类,相当稳定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物,其反应产物可用多种方法检测出来。由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此这个基因被普遍应用于基因调控的研究中。根据GUS基因检测所用的底物不同,可以选择三种检测方法:组织化学法、分光光度法和荧光法(灵感度为分光光度检测法较高)。其中较为常用的是组织化学法。江西糖原染色试剂盒推荐厂家巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。
临床意义:1.急性白血病类型的鉴别 红白血病的幼红细胞PAS染色多呈阳性反应,阳性率高,反应强;成熟红细胞有时亦可为阳性;急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞PAS染色多为红色颗粒或块状阳性反应;急性粒细胞白血病的原粒细胞呈阴性或胞质呈弥漫淡色阳性反应;急性早幼粒细胞白血病 异常早幼粒细胞的PAS染色为阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞PAS染色阳性反应呈弥漫分布的红色细颗粒,巨核细胞白血病原巨核细胞PAS染色呈阳性或强阳性反应,表现为红色颗粒或块状。2.各类贫血的鉴别 MDS、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血(曾称地中海贫血)的幼红细胞PAS染色多为阴性反应,有时可出现阳性反应;巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。
糖原染色临床意义:1、急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应;缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应;急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等,幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。2、帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞,巨核细胞呈强阳性反应;霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。3、帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞,腺细胞呈阳性反应。对临床样本进行染色,以便样本的进一步筛查和检测。
医院检验中心糖原染色操作规程:1.雪夫氏试剂:400m1 蒸馏水煮沸除去 C02,逐渐加碱性 品红 2.08 溶解后,待冷却至 60℃,加 1mm01 儿 HCl40ml, 再加偏重亚硫酸钠(NaHSO:)4g,次日加活性碳 1.5g, 放置半天后过滤。配好后液体为无色透明,保存于 4℃ 冰箱中。 2.过碘酸作用液:过碘酸 1g 溶于蒸馏水 100ml 中,或取 过碘酸钾(1tI04)0。698 加蒸馏水 100ml,微加热使溶 解,再加浓硝酸 0.3m1,置冰箱中保存。 3.固定液:95%乙醇 90ml 与甲醛 10m1 混匀。 4.20g/l 甲基绿:甲基绿 2g 溶于 100m1 蒸馏水。 [操作] _x000c_(1) 新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内 10 分钟。 (2) 水洗数次后,对照片先用唾液消化 30 分钟,也可在 同一片,在其中间用蜡笔划界,一半做对照,另一半做 测定。 (3) 水洗后,滴加过碘酸数滴于涂片上,作用 10 分钟后, 再水洗数次。糖原在肝脏及心肌疾患及某些的病变中分布和量都有一定改变。上海口碑好的糖原染色试剂盒量大从优
常需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行特殊染色。上海哪家生产糖原染色试剂盒推荐厂家
特殊染色方法选择应遵循:染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法;突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质,甲基紫染色法虽然流程较为简单,但结果不易保存,阳性对比度相对不突出;刚果红染色法阳性结果明显,长时间保存不褪色,流程简便,更是实用的方法。如显示弹性纤维,地衣红染色染液虽配制较方便,但结果对比度相对欠佳,与其他几个染色法相比,多不选择使用。上海哪家生产糖原染色试剂盒推荐厂家
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糖原pas染色液配制及使用方法:1、常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。3、自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。4、入过碘酸溶液,室温放置,一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室温阴暗处浸染。7、自来水冲洗10min。8、入苏木素染色液,染细胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗,使其返蓝。11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶...