江西糖原染色试剂盒

GUS染色步骤：1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保温1小时至过夜。 2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次，至阴性对照材料呈白色。 3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。江西糖原染色试剂盒

医院检验中心糖原染色操作规程：1．雪夫氏试剂：400m1 蒸馏水煮沸除去 C02，逐渐加碱性 品红 2．08 溶解后，待冷却至 60℃，加 1mm01 儿 HCl40ml， 再加偏重亚硫酸钠(NaHSO：)4g，次日加活性碳 1．5g， 放置半天后过滤。配好后液体为无色透明，保存于 4℃ 冰箱中。 2．过碘酸作用液：过碘酸 1g 溶于蒸馏水 100ml 中，或取 过碘酸钾(1tI04)0。698 加蒸馏水 100ml，微加热使溶 解，再加浓硝酸 0．3m1，置冰箱中保存。 3．固定液：95％乙醇 90ml 与甲醛 10m1 混匀。 4．20g/l 甲基绿：甲基绿 2g 溶于 100m1 蒸馏水。 [操作] _x000c_(1) 新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内 10 分钟。 (2) 水洗数次后，对照片先用唾液消化 30 分钟，也可在 同一片，在其中间用蜡笔划界，一半做对照，另一半做 测定。 (3) 水洗后，滴加过碘酸数滴于涂片上，作用 10 分钟后， 再水洗数次。哪家提供糖原染色试剂盒厂家现货过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18～22℃佳。

PAS染色试剂配制及染色方法：1.材料与方1.1 实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例，均来自我室实验材料。1.2 主要试剂1.2.1 AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液，其配方：无水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3 过碘酸溶液 0.5g过碘酸（HIO）溶于100mL蒸馏水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：过碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸钠0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 无色品红液（Schiff氏液） 在三角烧内加入蒸馏水500mL，煮沸后，在保持微沸的情况下，加入碱性品红2.5g，并不断摇动约5min（勿使之沸腾），使碱性品红彻底溶解（溶解液为深红色）。冷却到50℃时，过滤，加入1N盐酸50mL，再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g，塞住瓶口，摇动容器以充分混合（此时颜色明显变淡），然后避光放置或冰箱内24h。

特殊染色化学试剂的选择：化学试剂的选择主要针对自配试剂而言，对于商品化试剂盒则在于染液质量。1、一般要求选用很好品牌的化学试剂，特别是一些染色中关键的试剂。很好的化学试剂（如Sigma、国药、阿拉丁、西陇等）是保证高质量染液的前提和关键，特别对于染液中的关键试剂尤为重要。如碱性品红在一些染色液（抗酸、无色品红、醛品红等）中均为主要试剂，其质量决定了较终的染色效果。如配制无色品红染液时，所使用的偏重亚硫酸钠试剂质量不合格，则会导致染液配制失败，无法染出合格的切片。2、纯度一般以分析纯为主。多糖主要指糖原，它是一种胶样液态存在于肝细胞、骨骼肌、心肌等处。

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色试剂盒不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化，这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解，形成水溶性的双糖-麦芽糖，在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段，但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑，不主张应用唾液。可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。江苏正规糖原染色试剂盒进货价

如用无水酒精作糖原的固定剂，有它的弊病。江西糖原染色试剂盒

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2） 0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。（3）蒸馏水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分钟。（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用）（5）流水冲洗10分钟。（6）苏木素浸染细胞核2-3分钟。（7）脱水、透明、封盖。结果：糖原呈红色，细胞核呈蓝色。试剂 配制：（1）0. 5%过碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏 试剂 。碱性品红 1g蒸馏 水 200ml1N盐酸（98.3ml比重1.16盐酸，加入 蒸馏 水成1000ml） 20ml偏重亚硫酸钠或钾 1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水，搅拌加热沸腾，待冷却至50℃过滤，加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处，两天后溶液变桔黄色或草黄色，然后加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色，染色效果较差。江西糖原染色试剂盒

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