鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境,使细胞在三维环境中生长。1,在使用鼠胶原蛋白型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。1mg/ml浓度以上,pH左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。使用方法:1、细胞培养器皿的表面包被推荐浓度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格体积加到相应的培养器皿中。使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。上海正规鼠尾胶原产品介绍

鼠尾胶原,10mg包装,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超纯水至100ml,容量瓶配制比较准确。2.用吸管吸取10ml刚配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z准确),加入盛胶原的瓶中,轻轻颠倒,不要震荡,蛋白容易起泡。几分钟即可,蛋白质非常好溶解。3.将胶原溶液移入事先压好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大点的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一档就行,避免加入气泡。然后4度过夜除菌。4.第二天将上层胶原溶液分装进EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷冻。上海正规鼠尾胶原产品介绍鼠尾胶原,是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用。

含细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。加入760μL的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。
简介:鼠尾I型胶原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备,纯度达到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养;也可用于制备三维胶原凝胶,使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准:1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞,贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL,pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶,NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。制备鼠尾胶原(两个同学一组操作)。

鼠尾胶原凝胶体在皮肤细胞原代培养中的应用:在国外的药理,毒理和皮肤病学的研究领域中已得到的限翩,否则培养成功率极低.本文采用鼠尾胶原凝胶体作为滋养层,提高了培养细胞的材料和方法r1]实验材料:培养液DEIdE(G皿}ao),表皮细胞生长因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品厂),氢化可的松,胰岛素(Sigm,青,链霉素,胰蛋白酶,]~DTA,细胞培养皿~35mill(00rningrSA).(2)皮肤基底细胞的分离和细胞悬液的制备:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮肤,剪下皮肤后.以消化12h.轻刷表皮面,收集细胞悬液,加入细胞培养液.用梯度离心收集细胞,以3xi0/m]浓度接种平皿.(3)鼠尾胶原凝胶体的制备:具体方法参见文献c13o(4)培养皿的胶原铺制:i.0ml的酸溶解胶原滴入~35mm培养皿中,铺满平皿底部;将平皿暴露于氨气中30min,然后置空气中30rain,散尽剩余氨气。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。胶原蛋白(Collagen)是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分。广州正规鼠尾胶原推荐厂家
为了能够从小鼠身上提取足够的DNA,要从它们身上取下足量的细胞用于实验。上海正规鼠尾胶原产品介绍
鼠尾胶原蛋白的用途是什么:在工业应用方面,鼠尾胶原蛋白用于培养容器等实验室设备的内部涂层。设备上的胶原蛋白薄层通常被允许干燥。它还可以用来制造一种凝胶,可当作悬浮细胞的培养基。此外,还可以把它当胶水使用。在化妆品行业,鼠尾胶原蛋白可当作沐浴液和肥皂中的凝胶。它还用于生产能减少皱纹和改善皮肤质量的面霜或护肤霜。不过,用于抚纹,或使嘴唇显得更大更饱满的注射用胶原蛋白通常是从牛或猪提取。不过,用于抚纹,或使嘴唇显得更大更饱满的注射用胶原蛋白通常是从牛或猪提取。上海正规鼠尾胶原产品介绍
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:三维胶原的制备鼠尾胶原蛋白型在浓度1mg/ml以上,pH左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液(均需要无菌、预冷)10mg/L酚红用于pH指示)0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),双蒸水200ul鼠尾胶原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结)...