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外泌体（exosomes）是活细胞经过"内吞-融合-外排"等一系列调控过程而形成的膜性囊泡，来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)，直径约为30-150nm，密度在1.13-1.21g/ml，天然存在于血液、唾液、尿液及母乳等体液中，同时外泌体也存在于组织和细胞间隙中。人体中几乎所有类型的细胞均能产生外泌体，人体中大约有1014个外泌体，大约平均每个细胞产生1000-10000个。外泌体中含有核酸（DNA、miRNA、lncRNA、mRNA、tRF等）、蛋白和脂类，在细胞间物质和信息转导中发挥重要作用，研究表明其在干细胞、免疫调控、瘤转移、血管生成以及生物标志物等领域都发挥着不可替代的作用现已证实可以分泌外泌体的细胞有：肥大细胞、淋巴细胞、树突状细胞、一些病症细胞、间充质干细胞等。长沙外泌体提取试剂厂家

用于外泌体提取的体液收集注意事项：1、选择血清还是血浆？推荐大多数研究选择血浆。血液凝固过程中血小板会产生大量外泌体，含量占血清中外泌体的50%以上，选择血浆可避免不必要的影响。2、注意抗凝剂的选择。肝素类抗凝剂与PCR假阴性有关，这可能是因为肝素与引物和/或酶有竞争作用。除了克制PCR，肝素可以与外泌体结合，阻止细胞摄取外泌体。因此需要记录肝素类药物的患者的血液样本。EDTA和双嘧达莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的并克制其释放外泌体。EDTA可能会干扰PCR反应（尽管其程度小于肝素），但是还是优于其他选择。此外，有研究表明钙螯合剂可在体外促进外泌体与血小板的结合从而降低经EDTA、或柠檬酸盐处理后的血液样本中外泌体的表观数量。使用肝素时这种影响就不会发生，因此建议在测量外泌体的精确数量时选用肝素。但是也有研究表明肝素可以导致体外条件下外泌体的减少。总之，目前尚需要更多的研究论证抗凝剂是否及如何对外泌体的释放，作用和下游反应产生特异性影响。郑州外泌体提取试剂哪家便宜将人尿液来源细胞的培养基通过0.22微米滤膜过滤，以去除大的细胞残片以及其它杂质。

大量关于一些病症相关巨噬细胞的研究表明，一些病症相关巨噬细胞通过与一些病症细胞进行细胞间通讯，与一些病症进展和转移相关，然而对TAM与一些病症细胞之间通信的研究限制于可溶性因子，例如促炎细胞因子，其中包括趋化因子、炎症因子和生长因子等。较近的研究证据表明，外泌体是一些病症微环境中不同细胞类型之间的重要通讯媒介。外泌体将信息从一个细胞传递到另一个细胞并重编程受体细胞。目前大部分研究都集中在一些病症细胞分泌的外泌体，关于TAM衍生的外泌体及其对治病细胞的影响知之甚少。TAM具有两种相反的表型：M1亚型巨噬细胞具有抗一些病症作用，M2型巨噬细胞具有致瘤作用活性。TAM的表型由特定的一些病症来源的趋化因子和外泌体调节。较近的一项研究表明，一些病症来源的外泌体miRNA调节一些病症促进M2巨噬细胞的极化。然而，TAM衍生的外泌体对一些病症进展和转移的调节尚未明确定义。目前，TAM的外泌体概况仍然大部分未知，并且TAM衍生的外泌体对于一些病症进展在功能上是否必需还未确定。

外泌体的提取方法学规范、统一定量及鉴定等。关于外泌体的提取有超速离心、试剂盒、超滤法、蔗糖密度梯度离心等，然而各种方法均有其利弊。超速离心法是目前外泌体相关文章中的主流方法，由于离心步骤繁琐，费事费力，而且步骤多导致实验中容易污染，且损耗量大，使得较终回收的外泌体不稳定。而且对于抽提细胞上清来说，更是极为不请便，试想用提取300ml的上清需要6个50ml离心管，无论是过滤还是后续的每一步的离心去沉淀，都具有操作极其不便的缺点，总之非常麻烦。而超滤法存在外泌体会堵塞膜孔，造成浓缩效率低，浓缩管重复利用差，甚至堵塞在膜孔的外泌体还可能会粘连成团，造成损失及较后的数据有误差，对于后续实验也有影响超速离心法是目前外泌体相关文章中的主流方法，由于离心步骤繁琐。

作为一种分子通断开关的KRAS发生突变时会处于“开启”状态。在80%～95%的胰腺导管腺病（PDAC）当中，这个基因发生突变，这也是这种一些疾病中较为常见的突变。这些研究人员证实iExosome能够运送特异性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子，并且比他们的合成对应物脂质体（liposome）更加高效。脂质体不具有外泌体表现出的天然复杂性和优势。德州大学MD安德森一些疾病中心一些疾病生物学助理教授ValerieLeBleu博士说，“我们的研究提示着与脂质体相比，外泌体表现出运送siRNA分子和压制侵袭性胰腺瘤生长的优异能力。我们也证实外泌体表面上的CD47存在允许它们躲避来自循环单核细胞的吞噬作用。外泌体的提取分离：密度梯度离心。上海正规外泌体提取试剂进货价

外泌体的提取方法：色谱法。长沙外泌体提取试剂厂家

外泌体与神经退行性疾病：外泌体可能促进或限制大脑中未折叠和异常折叠的蛋白质的聚集。AD病人脑脊液外泌体中均可检测到Tau和Aβ蛋白。类似的现象也在PD和ALS疾病中发现。PD病人脑脊液外泌体可检测到α-synuclein，ALS病人外泌体中也可以检测到SOD1或TDP-43。外泌体与疾病诊断（应用潜能）：外泌体生成机制表明，通过分析外泌体的组分，可以帮助识别其来源的细胞类型。这一特性已被应用于开发心血管疾病，神经系统疾病和一些病症的分子诊断方法，也在肝肾肺相关疾病中进行研发测试。将沉淀物用PBS缓冲液进行悬浮，使外泌体悬浮于液体上层长沙外泌体提取试剂厂家