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外泌体的提取、分离方法：聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分离病毒和其他的生物大分子已有50多年历史，近几年，将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前，市场已经有应用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒，较常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits，该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器，但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜，之后再低速离心。将人尿液来源细胞的培养基通过0.22微米滤膜过滤，以去除大的细胞残片以及其它杂质。上海正规外泌体提取试剂厂家批发价

外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体初次于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。正规外泌体提取试剂直销厂家它普遍存在并分布于各种体液中，携带和传递重要的信号分子。

外泌体相关蛋白质与肺病的诊断：近年来，高通量质谱分析被普遍地应用于筛选NSCLC外泌体蛋白的研究，这为我们揭示了更多具有生物标志物价值的分子。Birgitte等采用微阵列芯片技术研究了431例肺病患者和150例对照者血浆外泌体中的蛋白表达情况，发现CD151、CD171和TSPAN8这三种蛋白表达不光能区分一些病症与正常组织，同时也能区分各种肺病的组织亚型。此外，联合应用这三种蛋白诊断NSCLC的AUC达到0.74。Clark等采用纳升液联用技术（nano-ESI-LC-MS/MS）分析了来自正常支气管上皮细胞系和两个携带NSCLC细胞系的外泌体的蛋白表达谱，从中筛选出如细胞外基质金属蛋白酶诱导因子、溶酶体膜糖蛋白2等多种存在显着性差异表达的蛋白，同时检测分析这些蛋白有助于提高NSCLC诊断的敏感性和特异性。由于国内有关外泌体提取试剂的缺乏，我国对外泌体的研究还基本依赖于过程繁琐的超速离心和进口提取试剂盒。

有研究发现，NSCLC患者肺组织外泌体表面EGFR免疫染色呈阳性的占80%，而慢性肺炎组织的外泌体EGFR呈阳性的只占2%，因而认为外泌体的EGFR蛋白可以用作NSCLC与慢性肺炎鉴别诊断的生物标志物。Park等通过Sys-BodyFlu-id数据库分析发现153种特异性胸腔积液外泌体蛋白质，进一步的Westernblotting分析显示多种特异性胸腔积液外泌体蛋白参与EGFR信号传导途径以促进一些病症的发生的发展，因此外泌体蛋白可能作为肺病诊断筛查的生物学标记物。外泌体相关蛋白质与肺病的诊断：近年来众多文献报道，肺病细胞分泌的外泌体中富含多种蛋白质并促进肺病的发生的发展，是早期诊断肺病的有效途径。外泌体提取：低速离心去除细胞和凋亡碎片。

由欧洲多国细胞外囊泡领域的学者发起并成立的国际细胞外囊泡协会（ISEV）于2014年在协会会刊JournalofExtracellularVesicles发表了一个指导性意见，也就是我们常说的MISEV2014。2018版《指导要求》进行了修订。2018版的《指导要求》首先讨论了对这些细胞来源的非细胞具膜结构如何称呼。学者们普遍认为应当使用细胞外囊泡（extracellularvesicle）来称呼这些具膜囊泡，当我们使用常规方法分离这些结构时不推荐使用其他的名称来称呼它们。外泌体的提取方法：密度梯度离心。外泌体提取试剂产品介绍

外泌体提取：使用抗体包被珠子的分离不适合从大量样本中获得外泌体。上海正规外泌体提取试剂厂家批发价

外泌体与肺病预后：外泌体mirRNA和蛋白质被认为是NSCLC的预后因子。Dejima等在研究NSCLC患者预后的生物标志物时发现，外泌体miR-4257和miR-21的含量显着上升。此外，还有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者较高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的复发率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血浆的外泌体时发现，NY-ESO-1是其中对低生存率有显着影响的标志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系统分析了28位NSCLC患者体内的365种miRNA，其中let-7f、miR-30e-3p和miR-20b表达均下调，进一步研究发现，let-7f和miR-30e-3p水平可以区分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p与不良预后密切相关。上海正规外泌体提取试剂厂家批发价