注意事项:染色时:①染色时必须严格按照染色操作说明书进行染色。②在染色过程中,前一个染液浸染完成后,在进行下一个染液的步骤之前,必须彻底充分水洗,使前一个染液冲洗干净后再进行下一步骤。③每次滴加染液前,务必吸干组织上多余的水分,避免多余的水把染液稀释了,造成染色不佳。④在滴加染液时,务必使染液完全覆盖组织,但不能溢出圈外,避免浪费试剂。在染色时,用有色铅笔在组织周围划一个圈,这样在滴加染液时就不会使染液溢出。骨骼肌活检临床操作及染色质量控制。天津糖原染色试剂盒厂家直销
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能较好地保存糖原,但有使糖原流动到细胞一侧的现象,多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存,是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此较好不单独使用乙醇固定,以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳山东正规糖原染色试剂盒厂家直销可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。
特染的应用价值:现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益普遍,但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵,对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势,在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。比如,当细胞中出现色素,是黑色素还是含铁血黄素以及当组织中出现均一化学物质是否为淀粉样变性等,用组织化学技术区别起来很简单,所以组织化学技术,虽然已有几十年到几百年的历史,仍是一个很有实用价值的技术。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蜡切片脱蜡至水。(2)0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液(过碘酸再结晶应重新配制使用)。(3)蒸馏水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分钟。(Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用)(5)流水冲洗10分钟。(6)苏木素浸染细胞核2-3分钟。(7)脱水、透明、封盖。结果:糖原呈红色,细胞核呈蓝色。试剂配制:(1)0.5%过碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏试剂。碱性品红1g蒸馏水200ml1N盐酸(98.3ml比重1.16盐酸,加入蒸馏水成1000ml)20ml偏重亚硫酸钠或钾1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水,搅拌加热沸腾,待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处,两天后溶液变桔黄色或草黄色,然后加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差。过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。
GUS染色步骤:1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保温1小时至过夜。2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次,至阴性对照材料呈白色。3.肉眼或显微镜下观察,白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注:用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如,拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片(1-3mm)。当操作大的组织和样品时,可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。植物材料在选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分。湖南哪家生产糖原染色试剂盒报价
糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义。天津糖原染色试剂盒厂家直销
糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:纯酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以选用75%酒精配制1)过碘酸酒清夜配法:过碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml)5ml蒸馏水10ml保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.2)Schiff氏液:0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml纯酒精23ml4)亚硫酸水1%偏重亚硫酸蒸馏水180ml的树胶溶解天津糖原染色试剂盒厂家直销
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。3、自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。4、入过碘酸溶液,室温放置,一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室温阴暗处浸染。7、自来水冲洗10min。8、入苏木素染色液,染细胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗,使其返蓝。11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶...