糖类染色:糖类从组织化学技术角度来分,可分为多糖、中性粘液物质、酸性粘液物质、粘蛋白及粘脂质。多糖主要指糖原,它是一种胶样液态存在于肝细胞、骨骼肌、心肌等处。因糖原在肝脏及心肌疾患及某些的病变中分布和量都有一定改变,故糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义。(1)肝及心肌糖原沉着症的诊断:糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。(2)糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。(3)高雪氏病与尼曼——匹克氏病的鉴别:前者为阳性、后者为阴性,做此染色较易鉴别。(4)骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断:此瘤80%细胞内有较多糖原,糖原染色为阳性,所以糖原染色为阳性(大多数细胞)可以协助诊断。(5)腺泡状软组织肉瘤与化感瘤:前者棒状小体糖原染色为阳性。推荐用于骨和软骨的染色。江西糖原染色试剂盒
糖原及粘液染色法注意事项:1、糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病,因无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化,(极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果较佳,其配法如下:苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各种试剂必须化学纯,亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏试剂,在经过活性碳吸附漂白后不显无色,首先应考虑试剂中的偏重亚硫酸钠是否失效。如果偏重亚硫酸钠气味不浓,使用时可考虑适当的增加用量。其次考虑碱性品红本身,常常虽属同一生产厂家,但不同批号,其效果就可能不同,应特别引起注意~天津哪家提供糖原染色试剂盒厂家批发价如PAS染色可显示糖原、黏液等。
PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段,但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑,不主张应用唾液。所以网状纤维的组织化学染色,在临床病理诊断上占着相当重要的位置。
特殊染色化学试剂的选择:化学试剂的选择主要针对自配试剂而言,对于商品化试剂盒则在于染液质量。1、一般要求选用很好品牌的化学试剂,特别是一些染色中关键的试剂。很好的化学试剂(如Sigma、国药、阿拉丁、西陇等)是保证高质量染液的前提和关键,特别对于染液中的关键试剂尤为重要。如碱性品红在一些染色液(抗酸、无色品红、醛品红等)中均为主要试剂,其质量决定了较终的染色效果。如配制无色品红染液时,所使用的偏重亚硫酸钠试剂质量不合格,则会导致染液配制失败,无法染出合格的切片。2、纯度一般以分析纯为主。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差。
GUS染色步骤:1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保温1小时至过夜。2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次,至阴性对照材料呈白色。3.肉眼或显微镜下观察,白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注:用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如,拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片(1-3mm)。当操作大的组织和样品时,可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应。天津口碑好的糖原染色试剂盒厂家直销
特殊染色是为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质。江西糖原染色试剂盒
糖原染色的原理与操作方法是什么:(1)原理:过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合,形成紫色化合物,定位于细胞质中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分钟,流水冲洗,晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟,流水冲洗,晾干。滴加雪夫液作用60分钟,流水冲洗,晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟,流水冲洗,晾干镜检。细胞的组织化学方法,是研究细胞成分常用的方法之一。它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应,从而在细胞局部形成有色沉淀物,再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。江西糖原染色试剂盒
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。3、自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。4、入过碘酸溶液,室温放置,一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室温阴暗处浸染。7、自来水冲洗10min。8、入苏木素染色液,染细胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗,使其返蓝。11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶...