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目前的主流观点认为，外泌体的产生过程为：细胞膜内陷，形成内体（endosome），再形成多泡体（multivesicularbodies，MVB），较后分泌到胞外成为外泌体。外泌体中携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息。外泌体较早见于1981年，EGTrams等在体外培养的绵羊红细胞上清液中发现了有膜结构的小囊泡，并命名为exosome。对于外泌体的作用，当时推测为细胞排泄废物的一种方式。1996年GRaposo等发现类似于B淋巴细胞的免疫细胞也会分泌抗原呈递外泌体（antigenpresentingvesicle），所分泌的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗一些病症反应。2007年HValadi等进一步发现细胞之间可以通过外泌体中RNA交换遗传物质。随着有关外泌体研究越来越多，研究者发现它普遍参与了机体免疫应答、抗原呈递、细胞分化、一些病症生长于侵袭等各种生物过程中。目前人们多采用超速离心、免疫磁珠、超滤、沉淀或试剂盒等方法实现外泌体的提取分离。外泌体提取：低速离心去除细胞和凋亡碎片。无锡正规外泌体提取试剂哪家好

由欧洲多国细胞外囊泡领域的学者发起并成立的国际细胞外囊泡协会（ISEV）于2014年在协会会刊JournalofExtracellularVesicles发表了一个指导性意见，也就是我们常说的MISEV2014。2018版《指导要求》进行了修订。2018版的《指导要求》首先讨论了对这些细胞来源的非细胞具膜结构如何称呼。学者们普遍认为应当使用细胞外囊泡（extracellularvesicle）来称呼这些具膜囊泡，当我们使用常规方法分离这些结构时不推荐使用其他的名称来称呼它们。石家庄外泌体提取试剂厂家批发价重复离心操作还有可能对囊泡造成损害，从而降低其质量。

外泌体的提取方法：1.超速离心法（差速离心）。超离法是较常用的外泌体纯化手段，采用低速离心、高速离心交替进行，可分离到大小相近的囊泡颗粒。超离法因操作简单，获得的囊泡数量较多而广受欢迎，但过程比较费时，且回收率不稳定（可能与转子类型有关），纯度也受到质疑；此外，重复离心操作还有可能对囊泡造成损害，从而降低其质量。2.密度梯度离心。在超速离心力作用下，使蔗糖溶液形成从低到高连续分布的密度阶层，是一种区带分离法。通过密度梯度离心，样品中的外泌体将在1.13-1.19g/ml的密度范围富集。此法获得的外泌体纯度较高，但步骤繁琐，耗时，对离心时间极为敏感。

用于外泌体提取的体液收集注意事项：1、抽血技巧。操作要轻柔迅速。试管可翻转8-10次使样本与抗凝剂混匀，避免剧烈摇晃。混匀后，将试管固定垂直放置于离心分离器，在顶部记录抽血的准确时间，因为抽血与离心之间的时间间隔可能是一个影响因素。外泌体在抽血后30分钟内是比较稳定的，若时间过长将导致外泌体数量增加。血小板极易因抽血时的物理因素而并释放出外泌体，其中包括接触、压力、切力。2、抽血时间。除了血液黏度，体内血液的各项指标在1天中变化很大。生理节律会对血小板的产生很大的影响。白细胞的募集和循环系统中促炎细胞和细胞会随时间变化。大量的具有特殊表面分子的微粒也被证明会随时间变化。目前尚无设计较好的实验对证实不同时间血液中外泌体的变化，故应在相同的时间采集样本。目前饮食是否会对EV产生影响尚未可知，但是由于脂蛋白可运载RNA且食物的摄取可以影响循环脂蛋白颗粒的类型、数量和作用，故抽血可在较后一次用餐后一段确定的时间进行。外泌体提取：高速离心沉淀外泌体。

研究初次发现疟原虫传染小鼠血浆外泌体(exosomes)能够压制一些病症血管生成，并初步阐明其分子机制。研究加深了对疟原虫传染宿主所分泌的外泌体与一些病症血管生成之间的相互作用的认识，为开发疟原虫传染来源的外泌体作为一种新型抗一些病症制剂奠定了基础。研究人员选用肺病小鼠模型作为研究对象，从传染疟原虫的小鼠血浆中获得外泌体，并将这些外泌体注射到小鼠的一些病症内部，并与没有疟原虫传染的小鼠血浆外泌体进行对照。研究发现，疟原虫传染小鼠的血浆外泌体明显压制一些病症血管的生成。进一步的研究发现，疟原虫传染的小鼠血浆外泌体通过至少四种特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5p)压制血管内皮细胞VEGF受体(VEGFR2)的表达从而阻断血管生成的信号通路。这些发现加深了人们对疟原虫抗病机理的理解，并为疟原虫疗法治病一些疾病的临床研究提供进一步的理论依据。外泌体作为内源性的天然药物载体有着独特的优势，表面由脂质和蛋白质组成。石家庄外泌体提取试剂厂家批发价

超速离心法是目前外泌体相关文章中的主流方法，由于离心步骤繁琐。无锡正规外泌体提取试剂哪家好

作为一种分子通断开关的KRAS发生突变时会处于“开启”状态。在80%～95%的胰腺导管腺病（PDAC）当中，这个基因发生突变，这也是这种一些疾病中较为常见的突变。这些研究人员证实iExosome能够运送特异性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子，并且比他们的合成对应物脂质体（liposome）更加高效。脂质体不具有外泌体表现出的天然复杂性和优势。德州大学MD安德森一些疾病中心一些疾病生物学助理教授ValerieLeBleu博士说，“我们的研究提示着与脂质体相比，外泌体表现出运送siRNA分子和压制侵袭性胰腺瘤生长的优异能力。我们也证实外泌体表面上的CD47存在允许它们躲避来自循环单核细胞的吞噬作用。”无锡正规外泌体提取试剂哪家好