酵母总RNA快速提取试剂盒(离心柱型):一、原理简介。改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA酶,然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,较后低盐的RNasefreewater将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。二、试剂盒特点:1、离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2、结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好,纯度高和离心柱方便快捷的优点,不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程,RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。3、独有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因组污染。tRNA是mRNA上碱基序列(即遗传密码子)的识别者和氨基酸的转运者。徐州石家庄RNA提取试剂
动物细胞RNA提取:1、悬浮细胞:可直接离心后弃掉培养基,用无菌PBS清洗1~2遍后,再用适量PBS悬浮起来,然后再加入裂解液进行裂解。千万不要完全弃掉液体后,往沉淀细胞里直接加入裂解液,这样会使外表层的细胞裂解后释放的组蛋白包裹粘附在沉淀细胞外侧,从而限制沉淀内部的细胞与裂解液的接触,从而导致细胞裂解不彻底,降低RNA得率。2、半贴壁或贴壁不紧的细胞:弃掉培养基后,用PBS洗1~2次,然后直接吸取适量PBS用吸管或者泵吹打培养皿,把细胞吹下来,转移到无RNA酶的EP管中,加裂解液进行提取。3、贴壁细胞:需要先用胰酶消化,然后收集到无RNA酶的EP管中,离心去其上清,用PBS洗1~2次,去除多余的胰酶,以适量PBS重悬后继续进行提取步骤。上海广州RNA提取试剂RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。
目前,主流的RNA提取方法有Trizol法、离心柱法和磁珠法。其中,Trizol法与离心柱法相比,提取效果相当,但因其对操作者带来的毒性,现在越来越被弃用。磁珠法可以针对大批量样本处理,适合机器自动化提取,但是提取核酸纯度低,提取得率低,且使用成本较高。对于拭子RNA含量较低的样本或比较珍贵的样本或样本总数不是很多的实验室,选择的拭子RNA提取方法应是离心柱法。近来,随着基因诊断技术的发展,从口腔拭子、泌尿生殖道拭子、痰液等样本中进行RNA提取的试剂盒的应用价值越来越大,如tumour早期诊断、遗传病检测和病原体传染核酸检测等。拭子RNA提取效果在很大程度上取决于采样质量、试剂盒性能等,特别是试剂盒的性能较大影响了拭子核酸的基因检测和各种研究的开展。
新型土壤总RNA快速提取试剂盒:独特裂解剂/裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后RNA在高离序盐状态下选择性吸附于玻璃奶,然后将粗纯化的玻璃奶转移到离心柱,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将腐植酸、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,较后低盐的洗脱缓冲液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。试剂盒特点:离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。兼容性强,适用于各种不同的土壤、粪便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9以上,可直接用于PCR,Northern-blot和各种酶切反应。RNA提取试剂注意事项:耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶。
RNA提取:预备工作(1)塑料制品:尽量使用一次性无菌塑料制品。已标明RNase-free的塑料制品,如没有开封使用过,通常不必再处理。处理的步骤如下:O在玻璃烧杯中注入去离子水,加入DEPC使其终浓度为0.05%~0.1%(DEPC-H2O)。(DEPC二乙基焦碳酸酯为活性很强的剧毒物,须在通风橱中小心使用)O将待处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中,注入DEPC-H2O,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通风柜中37℃或室温下处理过夜。O将DEPC-H2O小心倒入废液瓶中,将装有DEPC-H2O处理过的塑料制品的容器以铝箔封口,高温高压蒸汽灭菌至少30分钟。O灭菌塑料制品烘烤干燥,置洁净处备用。(2)玻璃和金属物品250℃烘烤3小时以上。植物RNA提取试剂产品特点:针对植物材料独特配置,操作更简单、流程更优化。杭州正规RNA提取试剂生产厂家
适用样品:全血,哺乳动物细胞,细菌细胞和菌类细胞。徐州石家庄RNA提取试剂
DNA和RNA的鉴别染色:利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室普遍采用。RNA是核糖核酸,DNA是脱氧核酸。区别:溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚来沉淀RNA。徐州石家庄RNA提取试剂
通用多糖多酚植物RNA提取试剂盒:1、多糖多酚植物RNA提取试剂盒整合了在提取过程中去除干扰物的技术,已成功用于葡萄,中草药等多糖含量高的样品,成功用于棉花等多酚含量高的样品。另外华越洋还开发了糖类清理剂,PCR压制物清理剂,核酸提取优化剂,样品核酸稳定剂,RNA组织样品保存液等核酸提取辅助产品。2、适用材料普遍:尤其适合解决多醣多酚,色素等次级代谢物丰富的植物样本难题。昆虫RNA柱式提取试剂盒特点:操作简单快速,处理一个样品只需要约十分钟。RNA纯度高,平均OD260/280一般都在2.0左右,能够有效去除大多数昆虫中的多糖污染。适用于各种昆虫组织,每100mg组织能提取到20~30μg总R...