天津正规RNA提取试剂直销厂家

RNA提取试剂注意事项：1、必须戴一次性手套操作，且尽量不要对着RNA样品说话，以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。2、TRIReagent含有毒物质苯酚，避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛，请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触TRIReagent，请立即用大量去垢剂和水冲洗，如仍有不适，请听取医生意见。3、TRIReagent抽提总RNA的同时，理论上也可抽提蛋白和DNA，但未经测试。4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。是基于异硫氰酸胍/苯酚法的一种即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂，在样品裂解或匀浆过程中取出水相，用异丙醇可沉淀回收RNA；中间层用乙醇沉淀可回收DNA；有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白。在裂解液上游加入酶裂解步骤（如蛋白酶 K、溶菌酶等）。天津正规RNA提取试剂直销厂家

RNA提取：预备工作（1）塑料制品：尽量使用一次性无菌塑料制品。已标明RNase-free的塑料制品，如没有开封使用过，通常不必再处理。处理的步骤如下：O在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使其终浓度为0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯为活性很强的剧毒物，须在通风橱中小心使用）O将待处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通风柜中37℃或室温下处理过夜。O将DEPC-H2O小心倒入废液瓶中，将装有DEPC-H2O处理过的塑料制品的容器以铝箔封口，高温高压蒸汽灭菌至少30分钟。O灭菌塑料制品烘烤干燥，置洁净处备用。（2）玻璃和金属物品250℃烘烤3小时以上。太原RNA提取试剂厂家推荐试剂盒中的吸附柱采用特殊的硅基质膜材料。

RNA提取注意事项：1、组织样本要尽可能的新鲜，避免反复冻融。2、提取时组织要充分研磨，组织量不宜过少，更不宜过多。3、加入裂解液后应给予充分的孵育时间，使样本充分裂解。4、在用Trizol法提取时，分层后吸取上清的原则是“宁愿少吸，不能多吸”，千万不能提取到中间层，否则会导致严重的基因组DNA污染。5、洗涤时洗涤液应充分浸润到管壁的四周，确保洗涤彻底。6、柱式提取法，洗涤完后除了对柱子进行空离后，还应当将吸附柱置于超净台内吹风5~10min，使有机溶剂充分挥发干。7、柱式法较后洗脱时候，当加入DEPC水后还应孵育3~5min，或者提前将DEPC水加热至60℃，可提高洗脱得率。传统的Trizol裂解异丙醇沉淀法较后RNA是用DEPC水溶解沉淀，则应当给予适当溶解时间，并用泵头不断吹吸离心管底部。

植物RNA快速提取试剂盒：1.固体组织破碎设备。可用下列装置之一：1)玻璃匀浆器。泡酸清洁，用高压灭菌蒸馏水洗涤数次。2)研钵。适用于液氮冻存组织的研磨，清洗方法同玻璃匀浆器。3)高速机械匀浆器(Polytron，Tekmar或类似产品)，打开开关，在蒸馏水中清洗分散器头数次。2.高压蒸汽30分钟消毒一次性吸头离心管。RNA沉淀溶解之后，应严格使用高压消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染环境下工作，在裂解步骤可使用未高压但洁净的一次性吸头和离心管，但光推荐在紧急情况下这样做。3.普通双蒸水，高压消毒20分钟。用于冲洗器皿，配制琼脂糖凝胶和电泳用缓冲液。DEPC处理的双蒸水。加DEPC到水中至终浓度为0.01%v/v，室温过夜，高压消毒30分钟。用于溶解RNA，配制TE缓冲液和75％乙醇。4.湿冰。在冰上进行操作有助于减少RNA降解。5.其它用品。电泳槽，双蒸水冲洗。离心机和加样器，无需处理。6.戴手套。注意某些实验如提取质粒DNA如使用极大量RNA酶，为防污染，须较全仔细清洗实验器具和实验区域。细胞质和细胞核RNA提取试剂盒特点：有效分离和提取细胞质RNA，与细胞核RNA。

RNA是核糖核酸，DNA是脱氧核酸。区别：紫外吸收：核酸的λm＝260nm，碱基展开程度越大，紫外吸收就越厉害。当A＝1时，DNA：50ug/ml，RNA和单链DNA：40ug/ml，寡核苷酸：20ug/ml。用A260/A280还可来表示核酸的纯度。沉降速度：对于拓扑异构体（核苷酸数目相同的核酸），其沉降速度从达到小依次为：RNA;超螺旋DNA>解链环状DNA;松弛环状DNA;线形DNA也就是在离心管中较上层是线形DNA，较下面是RNA。电泳：核苷酸、核酸均可以进行电泳，泳动速度主要由分子大小来决定，因此，电泳是测定核酸分子量的好方法。DNA分子量测定较直接的方法：用适当浓度的EB（溴嘧啶）染色DNA，可以将其他形式的DNA变成线形DNA，用电镜测出其长度，按B-DNA模型算出bp数，根据核苷酸的平均分子量就可计算出DNA的分子量。总共可以使用该试剂盒进行50次标准提取。长沙正规RNA提取试剂供应商

植物RNA提取试剂产品特点：RNA纯度更高，无杂质残留，特别适合于对纯度要求很高的下游实验。天津正规RNA提取试剂直销厂家

经典Trizol法并不能获得总RNA：这个事实可能会刷不少新手甚至老手的三观，但确有实验支持：经典Trizol法会选择性丢失低GC比的miRNA。这一点，源自一则作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韩国鼎鼎大名的美女科学家，专做RNA相关的研究，包括miRNA。几年前她们组发现一个奇怪的“现象”，即贴壁细胞在消化之后，会有一些miRNA的丰度突然降低，看起来好像是被快速“降解”掉了，并据此写了一篇文章发到MolecularCell上。但很快她们就发现，这个“现象”难以重复：如果用Trizol做实验，就一定是阳性结果，而用试剂盒提RNA，就重复不出来。难道是号称能提总RNA的Trizol方案出了问题？确实如此。经进一步实验后发现，经典的Trizol方案会使得低GC比的miRNA丢失。天津正规RNA提取试剂直销厂家