金华天津鼠尾胶原

一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法：胶原蛋白是脊椎动物和无脊椎动物支持结构的主要组成。在人的身体中这是皮肤、筋、软骨、骨骼及结缔组织的较主要的蛋白质。胶原蛋白占人体蛋白质总量的三分之一，不论来源于哪一种动物或哪一种组织的胶原都有许多共同特性。氨基酸组成中约有三分之一为甘氨酸，有脯氨酸和羟脯氨酸。根据其遗传分子结构遗传基因的差别，胶原蛋白分为20几个亚型。但较为常见的为Ι、Π、ΙΙΙ型胶原蛋白，即间质胶原蛋白。其中I型较为丰富且品质优良。I型胶原蛋白分布非常普遍，是主纤维束的主要成分，给结缔组织以强度；是较丰富的胶原蛋白类型，尤其是在皮肤真皮、骨、筋和腱中。细胞培养器皿的表面包被以包被浓度为2μg/cm2为例。金华天津鼠尾胶原

含细胞三维胶原凝胶的制备（以配制1mg/mL三维胶1mL为例）准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中（混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要测定pH值）。加入760μL的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存，切勿冻存，有效期一年。广州正规鼠尾胶原厂家直销制备鼠尾胶原：吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）。

详细步骤如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；2.将尾巴剪开、去掉皮毛，并剪成小段（3cm左右），抽出银色的尾键；3.把剪碎的尾键置于150ml，0.1％消过毒的醋酸中，4℃放置，并不时振荡；4.48h后取上清，4000转离心30min后，取上清；5.分装上清（鼠尾胶）4度（或-20度）保存。有时可继续向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重复以上步骤，以制备更多的鼠尾胶。在使用时，先将冰存的胶原液在室温下解冻，再按以下步骤包被培养器皿：1）用吸管吸取胶原液，在无菌的培养器皿的生长面内壁上均匀地涂上薄薄的一层胶原溶液。2）若包被的是培养瓶，可向培养瓶通入氨气或用浸有氨水的棉球封口片刻。让氨气充入瓶内后，即可旋紧瓶盖或塞紧瓶塞。若为培养皿或板的话，可将培养皿或板放在已消毒的饭盒内，将浸有氨水的棉球放入饭盒内，盖紧饭盒盖，四周用封口胶封死。

鼠尾胶原蛋白的用途是什么：在工业应用方面，鼠尾胶原蛋白用于培养容器等实验室设备的内部涂层。设备上的胶原蛋白薄层通常被允许干燥。它还可以用来制造一种凝胶，可当作悬浮细胞的培养基。此外，还可以把它当胶水使用。在化妆品行业，鼠尾胶原蛋白可当作沐浴液和肥皂中的凝胶。它还用于生产能减少皱纹和改善皮肤质量的面霜或护肤霜。不过，用于抚纹，或使嘴唇显得更大更饱满的注射用胶原蛋白通常是从牛或猪提取。不过，用于抚纹，或使嘴唇显得更大更饱满的注射用胶原蛋白通常是从牛或猪提取。当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片，制备细胞爬片时，可在瓶底涂一层胶原。

使用方法：1、细胞培养器皿的表面包被：以包被浓度为2μg/cm2为例，用无菌0.006mol/L乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/mL。加到相应的培养器皿中，确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。开盖在超净台上过夜晾干，也可以在室温放置1小时后，用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。2、三维胶原凝胶的制备：A、无细胞三维胶原凝胶的制备（以配制1mg/mL三维胶1mL为例）将200μL本品加到置于冰浴的离心管中，加入690μL双蒸水，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100μL10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中（混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要测定pH值）。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟。北京鼠尾胶原供应商

鼠尾胶原醋酸溶解：在无菌条件下转移上层的胶原溶液。金华天津鼠尾胶原

鼠尾胶原备用胶凝程序：1）在冰上放置以下物品：胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1MNaOH。2）确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3）在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4）在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS（终体积/10）mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积（不要添加到管中直到步骤4.6为止）终体积x终胶原蛋白I浓度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的胶原体积×0.023）mL的无菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水：添加蒸馏水体积=V（终）—V（胶原蛋白）—V(10×PBS）—V（1MNaOH）4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积，混匀，冰上备用。5）胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6）使用时，无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。金华天津鼠尾胶原