武汉无血清细胞冻存液推荐厂家

无血清细胞冻存液，细胞冻存与复苏后，平均活细胞回收比例超过80%。与含血清冻存液比较，BI无血清冻存液细胞存活率都有较佳的表，BI无血清细胞冻存液也适用于动物血清培养的细胞冻存。复苏细胞：1.将细胞冻存管由液态氮中取出，置于37度水浴快速溶解回温。此时可准备培养基、无菌15ml离心管、培养瓶。2.于生物安全柜内，直接以少量培养基反复冲融，使细胞团块化冻。3.先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基，再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g，3分钟离心收集细胞。4.倒去上清液，以新鲜培养基重悬细胞，移到培养瓶中培养。5.隔天更换新鲜培养基，并观察细胞存活状况。无血清细胞冻存液产品性能：胎牛血清取自牛，因此，难以应用到需要避免接触动物源的应用领域。武汉无血清细胞冻存液推荐厂家

冻存细胞注意事项：冷冻保护剂可降低培养基的冰点，并可减缓冷却速度，较大降低冰晶形成的危险(冰晶可损伤细胞，导致细胞死亡)。注：DMSO可促进有机分子进入组织。操作含DMSO的试剂时，应采用与此类物质安全危害相适应的设备和操作规范，并应按照当地法规处置此类试剂。建议可使用厂商生产的无血清细胞冻存液，使用方便，复苏率高。注意冷冻保护剂DMSO的品质：DMSO应为试剂级等级，无菌且无色，以5-10ml小体积分装，4℃避光保存，勿作多次解冻无锡无血清细胞冻存液平均价格适量地稀释后，将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。

无血清细胞冻存液与含血清细胞冻存液对比：传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，统称为含血清细胞冻存液。含血清细胞冻存液的一般的冻存方法是梯度降温冻存法，如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟，然后移至-20℃冰箱30分钟，再移至-80℃冰箱保存16-18个小时（或隔夜），较后才移至液氮罐中进行长期的储存。可见，含血清细胞冻存液冻存细胞时遇到的问题：1.冻存细胞时需现配冻存液(如购买市面上通用的含血清细胞冻存液，此步可省略)。2.需要程序降温（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步骤繁琐，耗时耗力。3.含血清，细胞污染(病毒、霉菌和支原体等)的风险更高。4.血清批次、品质间差异导致冻存液的批次间差异。5.需液氮冻存，且不能原位（如孔板）冻存。

细胞冻存及复苏的基本原则是“慢冻快融”，这样可以较大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多用二甲基亚砜（DMSO）作为保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性；缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少冰晶对细胞的物理损伤。复苏细胞采用快速融化的方法可以保证细胞外结晶在很短的时间内融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。血清完全细胞冻存液，通用于各种动物细胞株。特别配方有效提高细胞存活率和活力。不含动物来源性蛋白，能减少各类病毒、霉菌和支原体等污染，确保冻存细胞安全。适合用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。在细胞培养中，细胞冻存是较关键环节之一。

无血清细胞冻存液使用方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1）按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2）按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。3）取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去离心管中的上清液。4）加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。5）将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6）直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃以下冰箱，长期冷冻保存。无血清细胞冻存液产品特色：成分明确，无批次差异。北京无血清细胞冻存液价格

无血清细胞冻存液用于其他类型哺乳动物细胞的储存。武汉无血清细胞冻存液推荐厂家

细胞冻存，我们应该注意哪些事项：DMSO快速稀释会对细胞造成渗透性损伤，使存活率下降50%。对于DMSO冻存的细胞，复苏后应缓慢稀释成细胞悬液：1）冻存液：培养基=1:1稀释成细胞悬液后离心，然后重悬至培养皿中培养，隔天换液；2）冻存液：培养基=1:10稀释成细胞悬液，不用离心，直接放置到培养瓶中培养2-4小时后，换液。上述两种方法都是比较常用的细胞复苏方法，后者更适用于原代细胞或比较难养的细胞。液氮内的细胞冻存较长时间不要超过半年，冻存在液氮中的细胞应一段时间内进行更替。一个细胞系在培养一个月后，可复苏一管新的细胞确保其质量没有发生太大变化，传代几次后，再冻存留种。武汉无血清细胞冻存液推荐厂家