芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。POCT 芯片推动急诊检测向多指标联检升级,15 分钟内出具心肌损伤等多项结果。单分子阵列数字ELISA使用灵活
磁珠阵列化反应的信号处理优势:磁珠阵列化反应作为数字ELISA芯片的**环节,通过量子点标记与荧光共振能量转移(FRET)技术,实现信号的指数级放大。在IL-6检测中,每个磁珠捕获的抗原-抗体复合物携带多个量子点,单个荧光事件的信号强度较传统ELISA提升10倍以上,使0.5pg/ml的低浓度样本仍能产生***的荧光响应。信号处理软件通过多视场拼接与背景噪声扣除算法,进一步提升信噪比,确保弱阳性样本的准确识别。这种“信号放大+智能处理”的双重机制,使芯片在接近检测极限的浓度区间仍能保持良好的线性关系,为临界值样本的精细判断提供了技术保障。皮克级数字ELISA微量芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,微量多重检测,微量样本就能同时测试4项指标;
芯弃疾JX-8B数字ELISA
产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:
1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签
2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。
抗体筛选芯片:高效正交配对的关键工具,抗体筛选芯片在单通道内以3×6、4×5等排列方式预设18-21个抗体检测区域,支持288-336次测试/小时的高通量筛选,成为抗体开发领域的高效平台。其**优势在于“多、快、省”:单通道多指标检测能力满足多种抗体配对同时测试,5μl微量吸样适配珍稀临床样本,同一份样本可测试不同抗体配对,***降低实验成本。在IL-6抗体筛选案例中,8个捕获抗体与8个标记抗体的49种配对*需1小时即可完成初步筛选,快速锁定特异性与灵敏度合格的组合。该芯片适用于疾病初筛中标记物的正交配对筛选,尤其适合**困难场景下的交叉反应测试,如眼内房水病原体检测,为抗体工程与精细医疗提供了高效的筛选工具,加速高亲和力抗体的开发进程。芯弃疾芯片可检测血清中 NfL 等较低丰度神经因子,助力阿尔茨海默症早期筛查。
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
用DNA捕获探针(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA)功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的说明制备的。这些珠子与生物素化互补DNA的1μM(5’-生物素-CTCT)孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE缓冲液中过夜(16h)孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后,用PBS洗涤珠子三次含0.1%Tween-20的缓冲液。将珠子样品分装至微孔板中100μL中每孔给予400,000个微球。从微孔板孔中吸取缓冲液,将微球重悬后与不同浓度的ofSβG孵育。 芯弃疾JX-8B简易版单分子ELISA检测产品,极速检测,检测步骤只需要3次操作,远远快于常规ELISA;科研场景用数字ELISA高速检测
POCT 芯片搭配小型化设备,即时检测 hs-cTnT 等指标,为急诊救治提供快速数据支持。单分子阵列数字ELISA使用灵活
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我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。光纤束购自SchottNorthAmericaouthbri,非增强型光泽硅片购自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人,第7页盐酸、无水乙醇和分子生物学级别的吐温-20均购自西格玛-奥德里奇(圣路易斯,密苏里州)。2.7-μm-二羧基磁珠购自瓦里安公司(加利福尼亚州莱克福斯特)。单克隆抗人TNF-α捕获抗体、多克隆抗人TNF-α检测试剂和重组人TNF-α均购自R&DSystems(Minneapolis,MN)。单克隆抗PSA捕获抗体、单克隆抗PSA检测试剂和纯化的PSA购自BiosPacific(埃默里维尔,加利福尼亚州);使用标准方法将检测试剂抗体生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)和SuperBlock®T-20封闭缓冲液购自ThermoScientific(Rockford,IL)。纯化DNA购自综合DNA技术公司(Coralville,IA)。 单分子阵列数字ELISA使用灵活