创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
将约5cm长的光纤束依次抛光使用30微米、9微米和1微米尺寸的金刚石研磨膜的机器。抛光光纤在0.025M盐酸溶液中化学蚀刻130秒,然后立即浸入水中以抑制反应。蚀刻后的光纤在水中复溶5秒,在水中洗涤5分钟,然后在真空下干燥。光纤束阵列的中心玻璃和包层玻璃的蚀刻速率差异caused4.5-μmdiameter孔在中心光纤中形成30。更初研究了不同蚀刻时间对孔深的影响。如果孔太深,则每个孔中沉积多个微珠。井口密封性被破坏;如果井口太浅,则无法将微球保留在井内,且观察到加载效率较差。对于单个微球而言,井口深度of3.25±0.5μm是比较好的,同时保持良好的密封性。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,极速检测,检测步骤只需要3次操作,远远快于常规ELISA;单分子蛋白数字ELISA精密度
芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;
单分子的检测原理:由Simoa数字免疫分析法实现的超灵敏度已在先前讨论过。简而言之,类似免疫分析中的酶-底物反应是在相对较大的反应体积(50-100µL)中进行的,在信号生成步骤中稀释了产物分子。信号分子的扩散和稀释将灵敏度限制在皮摩尔范围内。相比之下,Simoa通过将单独标记的免疫复合物和底物限制在飞升大小的孔中,从而限制了荧光产物分子从酶-底物反应中的扩散。当单一酶标签催化底物转化为荧光产物时,产生的荧光团被限制在孔中,从而在短时间内产生可测量的荧光信号。 单分子蛋白数字ELISA精密度超多重检测芯片在普查中筛选高特异性标记物组合,提升早期诊断准确性。
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
在前列腺切除术后患者中,能够准确量化PSA水平的能力,即使在非常低的浓度(<300fM或10pg/mL)下,也应提供如果PSA水平升高,早期提示复发17,29。图4显示PSA水平使用数字ELISA在30名接受治理性前列腺切除术且术后至少6周采集血液的患者血清中进行测量。所有30例患者的血清PSA水平均低于商业检测限采用PSA数字ELISA(图3A)对全血清样本进行稀释1:4后测定,成功检测到所有30例患者中PSA,浓度范围为14fg/mL至9.4pg/mL,平均浓度为1.5pg/mL。需要进一步的临床研究来确定在RP患者中测量PSAfg/mL水平的诊断益处。
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
通过SiMoA对酶标记物进行数字检测的线性动态范围由区分“开启”和“关闭”孔的能力决定。在酶与珠子的比例较低(小于约1:10)时,泊松统计表明,只有统计学上有效果的群体珠子是指含有零和一个酶的珠子。只要足够多的珠子被检测,单个酶就可以被检测到,并且活性珠子的数量会超过泊松分布计数活性微球的噪声。在酶与微球的高比率(大于约(1:10),活性珠子的比例变得更高,泊松统计表明有大量含有多种酶的微球。为了定量检测到的酶的数量并保持含有多种酶的微球亚群中的线性对于酶,我们使用泊松统计法将活性珠子的数量转换为检测到的酶的数量 芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,低可测试到亚皮克级;
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
由于活性珠子的百分比接近50%(酶与微球的比例大于~1:1.5),然而,使用图像分析软件区分“开启”和“关闭”孔变得具有挑战性,我们达到了数字动态范围的实际上限。例如,图2中7fM(~45%活性)的信号偏离了线性。因此,这里使用50,000个孔展示的数字线性动态范围是从3.5fM到350zM,即大约四个对数单位。前提是蛋白质使用适当的酶浓度进行标记,这种动态范围对于许多临床应用来说是足够的 单分子阵列化技术通过微米级结构与二次流原理,稳定捕获磁珠,构建 “芯片实验室” 模式。医疗检测用数字ELISA精密度
芯弃疾芯片通过量子点阵列增强荧光信号,实现单分子级蛋白捕获与超敏检测。单分子蛋白数字ELISA精密度
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。 单分子蛋白数字ELISA精密度