芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。芯弃疾芯片可检测血清中 NfL 等较低丰度神经因子,助力阿尔茨海默症早期筛查。皮克级数字ELISA准确宽
数字ELISA芯片的标准化生产与质量控制,依托自研的单分子PDMS芯片产线,数字ELISA芯片实现了从材料制备到成品质检的全流程标准化。硅模制备精度控制在±1μm,确保磁珠捕获结构的一致性;PDMS预聚体真空脱气处理消除气泡干扰,键合强度>3MPa保障反应体系密封。成品质检环节通过荧光显微镜与自动计数系统,对磁珠捕获率(>95%)、荧光背景值(<500RLU)进行100%全检,良品率稳定在98%以上。标准化生产流程不仅保障了芯片性能的批次间一致性,更通过SPC统计过程控制持续优化工艺,为临床大规模应用提供了可靠的质量保证,推动数字ELISA技术从实验室走向产业化。科研数字ELISA精密度芯弃疾单分子ELISA检测盒,微量极速检测,微量检测15min就完成检测!
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
将约5cm长的光纤束依次抛光使用30微米、9微米和1微米尺寸的金刚石研磨膜的机器。抛光光纤在0.025M盐酸溶液中化学蚀刻130秒,然后立即浸入水中以抑制反应。蚀刻后的光纤在水中复溶5秒,在水中洗涤5分钟,然后在真空下干燥。光纤束阵列的中心玻璃和包层玻璃的蚀刻速率差异caused4.5-μmdiameter孔在中心光纤中形成30。更初研究了不同蚀刻时间对孔深的影响。如果孔太深,则每个孔中沉积多个微珠。井口密封性被破坏;如果井口太浅,则无法将微球保留在井内,且观察到加载效率较差。对于单个微球而言,井口深度of3.25±0.5μm是比较好的,同时保持良好的密封性。
芯弃疾JX-8B数字ELISA
产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:
1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签
2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。 芯弃疾JX-8B数字ELISA, 极速检测,快15min能完成 的ELISA检测!
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我们继续在两个关键领域改进SiMoA技术。首先,在两个关键领域可能再增加两个灵敏度等级基于对酶标记的敏感性(图2)可以检测蛋白质,如果非特异性相互作用可以更小化背景信号。单个珠子上分离和询问单个分子的能力为区分抗体-抗原结合事件和非特异性结合复合物。其次,我们简化了检测的物流。然而,即使在目前的形式下,我们相信数字ELISA有可能促进疾病的早期诊断和治理。 单分子阵列化技术通过微米级结构与二次流原理,稳定捕获磁珠,构建 “芯片实验室” 模式。单分子技术数字ELISA微量试剂
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多指标高通量数字ELISA芯片的临床应用:芯弃疾多指标数字ELISA芯片采用空间编码技术,单个芯片集成8个**检测通道,每个通道可同时检测2-8个靶标,支持多重蛋白标志物的并行分析。例如,在***性疾病诊断中,IL-6(灵敏度1pg/mL)与PCT(灵敏度10pg/mL)的双重检测可在15分钟内完成,覆盖脓毒症风险分层与细菌/病毒***鉴别。芯片内置微流控网络,通过毛细力驱动实现样本自动分配与试剂混合,无需外部泵阀,检测通量达336测试/小时(8样本×8指标)。在急诊科应用中,该芯片与便携式荧光扫描仪(尺寸20×15cm)配合,可在床旁快速评估炎症风暴(如IL-6>100pg/mL提示重症风险),辅助临床决策时间从4小时缩短至20分钟,效率提升80%。此外,芯片支持定制化指标组合,例如在肿瘤免疫***监测中,可同时检测PD-L1、IFN-γ及IL-2R,动态评估T细胞活性与药物响应,为个性化***方案优化提供数据支持。皮克级数字ELISA准确宽