芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
我们已经开发了两种临床相关蛋白的检测方法——前列腺特异性抗原(PSA)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),以确定高酶标记物单体提供的灵敏度转化为高灵敏度的检测方法血液中的蛋白质。两种蛋白质的数字ELISA如图1所示。开发这些试验的关键参数是:珠子浓度和两种标记试剂(检测试剂和酶偶联物)的浓度。珠子浓度的选择取决于几个相互竞争的因素。首先,足够的珠子必须在场以从热力学和动力学中捕获大部分目标分析物从热力学角度看,100μL中有20万个珠子,每个珠子大约有8万个与之结合的抗体25相当于约0.3nM的抗体浓度,在该浓度下,抗体-蛋白平衡导致高捕获效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未发表工作)。 超多重检测芯片在普查中筛选高特异性标记物组合,提升早期诊断准确性。单分子免疫检测数字ELISA使用效果
抗体筛选芯片的正交验证能力,抗体筛选芯片支持同一反应体系下不同样本的交叉反应测试,为抗体的正交验证提供了高效平台。在筛选IL-6抗体对时,可同时测试8种捕获抗体与8种标记抗体的组合,通过阴性质控品与阳性质控品的比值分析,快速排除非特异性配对,筛选出亲和力常数(KD)<10⁻⁹M的高特异性抗体。该能力在复杂样本(如含有异嗜性抗体的血清)检测中尤为重要,可提前识别潜在干扰因素,提升诊断试剂盒的临床适用性。此外,芯片的低密度阵列设计(如3×7排列)便于后续单克隆抗体的克隆化筛选,形成从初步筛选到精细优化的完整技术链条,加速抗体药物与诊断试剂的研发周期。POCT数字ELISA价格多指标高通量数字 ELISA 芯片单个样本可测 2-8 个指标,片内反应检测推动设备小型化。
芯弃疾JX-8B数字ELISA
产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:
1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签
2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本;通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA,从该实验中确定了LOD为~50aM(1.5fg/mL),相当于整个血清中的LOD为~200aM(6fg/mL)。检测到的比较低浓度为250aM,相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差,不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中,全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下,一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur,西门子)报告在人血清中的LOD为3pM(0.1ng/mL),并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 单分子阵列化技术通过微米级结构与二次流原理,稳定捕获磁珠,构建 “芯片实验室” 模式。
微量样本超多重检测的科研与临床价值:超多重检测芯片通过微流控分区技术,在单通道内集成21个**检测区(直径500微米),每个区域预埋特异性抗体,支持单次检测4-21个指标。以肺*筛查为例,芯片可一次性检测29种候选标志物(如CEA、CYFRA21-1、ProGRP),通过ROC曲线分析筛选出特异性>80%的组合(CEA+SA+CA242),诊断准确性从68%提升至92%。该芯片灵敏度达亚pg级(如IL-6检测下限0.5pg/mL),线性范围跨越3个数量级(1-1000pg/mL),且耗材成本较Luminex技术降低70%(单次检测成本<$50)。在科研领域,芯片支持微量样本(如穿刺活检液)中同时分析炎症因子(IL-1β、TNF-α)、血管生成标志物(VEGF)及代谢产物(乳酸),为**微环境研究提供多维度数据。临床验证显示,在100例乳腺*患者中,芯片检测的HER2与ER表达结果与IHC一致性达98%,为靶向***提供可靠依据。芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,微量样本可同时测2-4个指标;!单分子技术数字ELISA芯片
芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个生物实验室都能用的单分子检测;单分子免疫检测数字ELISA使用效果
全自动加样与图像分析系统:智能化检测的关键环节,全自动加样仪与图像分析软件构成数字ELISA芯片的智能化**,实现从样本处理到结果输出的全流程自动化。加样仪的8通道设计确保精细定量加样,避免人工操作误差,加样精度达±1%;图像分析软件通过荧光信号识别与四参数Logistic曲线拟合,自动计算浓度值,相关系数r²≥0.999,结果可靠性高。在自动版芯片检测中,系统可实时监控磁珠捕获效率,自动剔除异常数据点,确保CV值<5%。该智能化体系不仅提升检测效率,更降低了对操作人员的技术依赖,适用于基层医疗单位与高通量检测场景,推动免疫检测从人工操作向自动化、标准化转型。单分子免疫检测数字ELISA使用效果