参考原理:血液中单个蛋白质分子的检测有助于识别许多新的诊断性蛋白质标记物。我们报告了一种同时检测数百至数千个单独蛋白质分子的方法,该方法能够检测到非常低浓度的蛋白质。蛋白质被捕获在显微珠上,并用酶标记,每个显微珠上有一个或零个酶标记的蛋白质。通过将这些显微珠分离成50飞米的阵列反应室,单个蛋白质可以通过荧光想象检测到。通过单化这些阵列中的分子,~10-20种酶可以在100μL(~10−19M)中检测到。单个基于酶标记的分子酶联免疫吸附试验(数字ELISA)能够检测血清中临床相关的蛋白质,其浓度(<10−15M)远低于传统ELISA3-5。数字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除术的患者血清中检测到前列腺特异性抗原,比较低至14fmol/mL(0.4fmol)。
微量样本超多重检测芯片兼容血清、血浆、房水等多种样本类型,应用场景广。IVD数字ELISA芯片
神经退行性疾病的超早期诊断突破:单分子芯片通过检测血清中**丰度生物标志物(如NfL浓度<1pg/mL、pTau181低至),可在阿尔茨海默症(AD)临床症状出现前16年发现病理异常。临床研究显示,AD患者血清NfL水平较健康对照组升高3-5倍(p<),且与脑脊液检测结果高度相关(r=)。结合Aβ42/Aβ40比值(阈值<)与Tau蛋白磷酸化位点分析,芯片可精细区分AD、路易体痴呆及额颞叶痴呆,诊断特异性达92%。在药物研发中,该技术用于追踪抗Aβ单抗***的生物标志物动态变化(如Aβ42***率每月提升15%),为剂量调整与疗效评估提供量化依据。此外,芯片支持脑脊液替代检测,通过血清分析即可实现无创监测,患者依从性提升50%。 进口数字ELISA稳定性芯弃疾芯片可检测血清中 NfL 等较低丰度神经因子,助力阿尔茨海默症早期筛查。
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。循环血液转化为~2×10−15M(或2飞摩尔,fM);早期HIV传染血清中每mL含有10-3000个病毒颗粒,相当于p24抗原浓度范围为从50×10−18M(50attomolar,aM)到15×10−15M(15fM)10.尝试开发能够测量这些蛋白质浓度的方法集中在蛋白质上的核酸标记复制,11,12或测量整体、结合标记蛋白分子的性质13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金纳米颗粒和DNA生物条形码的标记物,已将蛋白质的检测范围扩展至低飞摩尔水平;更近使用该技术的一篇报道展示了检测到10飞摩尔PSA插入物17。这些方法所达到的灵敏度然而,检测蛋白质仍然落后于核酸,如聚合酶链反应(PCR),从而限制了蛋白质组中具有已在血液中检测到6,19。单个蛋白质分子的分离和检测为测量极低浓度的蛋白质s1,2提供了一种有希望的方法。
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品具有微量的优势:
微量:芯片上反应,流道区只有几十微米高度,极大降低试剂、样本用量;微量试剂检测:更少只需10ul样本、试剂只为常规的1/10;
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品具有灵活的优势:
灵活:可手动、可只使用8孔芯片,总成本、更小实验成本均较低,搭配使用常用实验室小型设备即可使用
测试结果:宽波长扫描仪结果-明场+荧光场同时看到磁珠与荧光,可观测每个磁珠上免疫反应的程度
先进新型的单分子检测方法的普及版 7)数字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速进行微量样本的检测;
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
我们已经开发了两种临床相关蛋白的检测方法——前列腺特异性抗原(PSA)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),以确定高酶标记物单体提供的灵敏度转化为高灵敏度的检测方法血液中的蛋白质。两种蛋白质的数字ELISA如图1所示。开发这些试验的关键参数是:珠子浓度和两种标记试剂(检测试剂和酶偶联物)的浓度。珠子浓度的选择取决于几个相互竞争的因素。首先,足够的珠子必须在场以从热力学和动力学中捕获大部分目标分析物从热力学角度看,100μL中有20万个珠子,每个珠子大约有8万个与之结合的抗体25相当于约0.3nM的抗体浓度,在该浓度下,抗体-蛋白平衡导致高捕获效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未发表工作)。 芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,微量检测,使用10uL样本就能测试;单分子阵列数字ELISA多重检测
数字化高敏ELISA芯片,可以进行8孔、4孔的灵活检测。IVD数字ELISA芯片
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
用DNA捕获探针(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA)功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的说明制备的。这些珠子与生物素化互补DNA的1μM(5’-生物素-CTCT)孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE缓冲液中过夜(16h)孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后,用PBS洗涤珠子三次含0.1%Tween-20的缓冲液。将珠子样品分装至微孔板中100μL中每孔给予400,000个微球。从微孔板孔中吸取缓冲液,将微球重悬后与不同浓度的ofSβG孵育。 IVD数字ELISA芯片